耐熱大腸菌群Thermotolerant coliform bacteria

  系一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌，在44.5℃培養24h~48h能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。

  該菌主要來(lái)自人和溫血動(dòng)物糞便，可作為糞便污染指標來(lái)評價(jià)化妝品的衛生質(zhì)量，推斷化妝品中有否污染腸道致病菌的可能。

操作步驟 

  1.取10mL 1:10稀釋的檢液，加到10mL雙倍乳糖膽鹽(含中和劑)培養基中，置44.5℃±0.5℃培養箱中培養24h±2h，如既不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，繼續培養至48h±2h，如仍既不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報告為耐熱大腸菌群陰性。

  2.如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，劃線(xiàn)接種到伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃±1℃培養18h~24h。同時(shí)取該培養液1~2滴接種到蛋白胨水中，置44.5℃±0.5℃培養24h±2h。

  經(jīng)培養后，在上述平板上觀(guān)察有無(wú)典型菌落生長(cháng)。耐熱大腸菌群在伊紅美藍瓊脂培養基上的典型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤。也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤；或粉紫色、中心較深的菌落，亦常為耐熱大腸菌群，應注意挑選。

  3.挑取上述可疑菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢。

  4.在蛋白胨水培養液中，加入靛基質(zhì)試劑約0.5 mL，觀(guān)察靛基質(zhì)反應。陽(yáng)性反應液面呈玫瑰紅色；陰性反應液面呈試劑本色。

檢驗結果報告

  經(jīng)上述檢驗步驟，若發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，平板上有典型菌落，并經(jīng)證實(shí)為革蘭氏陰性無(wú)芽胞短桿菌，靛基質(zhì)試驗陽(yáng)性，則可報告被檢樣品中檢出耐熱大腸菌群。