一、生化鑒定
（1）革蘭氏染色結果：大腸埃希氏菌為革蘭氏陰性桿菌
（2）對純培養物進(jìn)行靛基質(zhì)試驗、MR-VP試驗和檸檬酸鹽利用試驗。
挑取1-2個(gè)純培養的菌落至無(wú)菌生理鹽水管中充分振蕩混勻制成均一的菌懸液，打開(kāi)生化鑒定條的蓋子，用75%酒精擦拭打孔器，用打孔器開(kāi)孔或直接把膜撕掉；鑒定條每個(gè)孔中加入100 μL菌懸液。注：每條鑒定條含兩組生化，可鑒定兩個(gè)典型或可疑菌落。放置36℃±1℃培養。
靛基質(zhì)試驗：需在培養結束后滴加靛基質(zhì)試劑，立即或數秒內出現玫紅色環(huán)為陽(yáng)性反應，黃色環(huán)為陰性反應
甲基紅試驗：需在培養結束后滴加甲基紅試劑，立即顯紅色為陽(yáng)性反應，橙黃色為陰性反應；
V-P試驗需在培養結束后滴加V-P試劑，繼續培養4h，如出現變紅現象即為陽(yáng)性反應，不變紅為陰性反應；
西蒙氏枸櫞酸鹽可直接觀(guān)察結果，如出現變藍即為陽(yáng)性反應，不變色為陰性反應。
二、分離操作
將渾濁產(chǎn)氣的EC肉湯管混勻，取一環(huán)菌液，劃線(xiàn)至EMB平板（每個(gè)EMB平板編號與EC肉湯管編號對應）；同時(shí)劃線(xiàn)標準陽(yáng)性菌大腸埃埃希氏菌，同步培養作為對照。36℃培養18-24h。
三、結果報告
典型大腸埃希氏菌為++--，非典型大腸埃希氏菌-+--，統計出現以上結果的LST管的管數，查詢(xún)MPN表，報告每g(ml)樣品中大腸桿菌的MPN值。