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    腸桿菌科檢驗(二)確證實(shí)驗及計數方法


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    典型菌落的確認
    腸桿菌科典型菌落為有或無(wú)沉淀環(huán)的粉紅色至紅色或紫色菌落,選取典型菌落數在15 ~150 CFU之間、無(wú)蔓延菌落生長(cháng)的平板進(jìn)行計數,從每個(gè)平板上至少挑取5個(gè)典型菌落,分別劃線(xiàn)接種于營(yíng)養瓊脂平板上,36℃±1℃培養18h~24h,純化后的平板上菌落應形態(tài)大小一致,之后挑取平板上的菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢、氧化酶試驗及葡萄糖發(fā)酵試驗。
    確證實(shí)驗
    革蘭氏染色鏡檢:腸桿菌科為革蘭氏陰性桿菌,無(wú)芽孢,大小為(0.3~1.0) μm×(1.0~6.0) μm。
    氧化酶試驗:用一次性接種環(huán)或玻璃棒挑取單個(gè)菌落涂于浸濕氧化酶試劑的濾紙上,濾紙的顏色在10s內變成藍紫色,判為陽(yáng)性反應,不變色為陰性反應,腸桿菌科細菌應為氧化酶陰性。
    葡萄糖發(fā)酵試驗:挑取少許氧化酶陰性的同一個(gè)菌落,穿刺于葡萄糖瓊脂內,于36℃±1℃培養24 h±2 h,若試管內的內容物變?yōu)辄S色,判為陽(yáng)性反應。腸桿菌科細菌應為葡萄糖陽(yáng)性。
    計數方法
    之后按照視頻中不同情況的計數方法進(jìn)行計數。

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