樣品制備
取25g樣品，加入 3%氯化鈉堿性蛋白胨水 225 mL(HBJ003)，拍擊式均質(zhì)器拍擊 2 min，制備成 1:10 的樣品勻液。
定性檢驗
可直接將制備好的樣品勻液于36℃±1℃培養8h～18h。進(jìn)行培養。增菌培養結束后，用接種環(huán)在距離液面以下1cm內沾取一環(huán)增菌液，于TCBS平板(HB4130)或弧菌顯色培養基(HB7011-5或HBPM7011-1)平板上劃線(xiàn)分離。
定量檢驗
需將均質(zhì)后的樣品勻液進(jìn)行梯度稀釋后，再進(jìn)行增菌培養。吸取1mL樣品勻液，注入含有 9 mL 3%氯化鈉堿性蛋白胨水(HB4129-1)的試管內，振搖試管混勻，制成-2梯度的樣品勻液，按上述方法依次制備10倍梯度稀釋樣液，根據對檢樣污染情況的估計，選擇3個(gè)適宜的連續稀釋度，每個(gè)稀釋度接種3支含有9mL3%氯化鈉堿性蛋白胨水的試管，每管接種1mL。置36℃±1℃恒溫箱內，增菌培養8h～18h。
培養結束后，對所有顯示生長(cháng)的增菌液，用接種環(huán)取一環(huán)增菌液，于TCBS 平板(HB4130)或弧菌顯色培養基(HB7011-5或HBPM7011-1)平板上劃線(xiàn)分離。一支試管劃線(xiàn)一塊平板。于 36 ℃±1 ℃培養 18 h～24 h。。
典型特征
典型的副溶血性弧菌在TCBS 上呈圓形、半透明、表面光滑的綠色菌落，用接種環(huán)輕觸，有類(lèi)似口香糖的質(zhì)感，直徑2mm～3mm。
純培養
挑取3個(gè)或以上可疑菌落，劃線(xiàn)接種3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂平板(HB8631)，36 ℃±1 ℃培養18h～24h。