三糖鐵瓊脂（TSI）

簡(jiǎn)介：
三糖鐵試驗常用于沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、副溶血性弧菌等致病菌的生化鑒定和初篩。相比較于克氏雙糖鐵，三糖鐵中增加了蔗糖，擴大了非目標菌的排除范圍，增加了初篩的能力。
注：做弧菌的生化鑒定時(shí)，通常使用含1%或3%氯化鈉的三糖鐵瓊脂。
第一步：培養基制備
若使用干粉培養基自行制備三糖鐵斜面需要注意配時(shí)一定要加熱煮沸并不停攪拌至瓊脂完全溶解，才能分裝試管。不然會(huì )因為瓊脂沒(méi)有完全溶解，造成有些試管不凝固，或凝固不完全的情況。
將分裝好的試管放入滅菌鍋滅菌。
滅菌結束后，將試管擺成高層斜面狀，斜面/底層 ≈ 2/3 
若使用一次性塑料試管，則需將培養基滅菌后再進(jìn)行無(wú)菌分裝，擺高層斜面。（畫(huà)面：一次性塑料試管圖片）。
也可直接使用海博生物成品三糖鐵管進(jìn)行實(shí)驗，免去繁瑣的配制過(guò)程。
第二步：接種待測菌
用接種挑取待測菌落，在斜面上“之”字形劃線(xiàn)，再于底層穿刺（穿刺底層深度2/3左右即可），
培養過(guò)程中必須確保試管透氣性良好，使用成品三糖鐵管時(shí)不可將蓋子蓋緊
之后將培養基置于36±1℃培養18-24h后，觀(guān)察結果。
現象觀(guān)察
斜面或底層
若為紅色，則為產(chǎn)堿，常用“K”表示；
若出現變黃，則為產(chǎn)酸，常用“A”表示；
底層若有變黑出現，則為硫化氫陽(yáng)性；
若底層出現氣泡或瓊脂出現斷層，則為產(chǎn)氣陽(yáng)性。
斜面紅、底層黃的K/A型：此類(lèi)細菌僅能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，不能發(fā)酵乳糖和蔗糖，如大多數的沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、副溶血性弧菌等；
斜面和底層均為黃色的A/A型：此類(lèi)細菌則至少能發(fā)酵乳糖和蔗糖其一，如大腸桿菌、普通變形桿菌、霍亂弧菌等；
斜面和底層均為紅色的K/K型：此類(lèi)細菌通常不能發(fā)酵葡萄糖或僅能有氧分解葡萄糖，如銅綠假單胞菌、糞產(chǎn)堿桿菌等；
多數沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、變形桿菌可以產(chǎn)氣，出現氣泡或斷層；
產(chǎn)硫化氫的沙門(mén)氏菌和變形桿菌等底部可以觀(guān)察到變黑現象。