HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(GB)

往期回顧：
在之前單增李斯特氏菌的初步檢測實(shí)驗視頻中，我們分離出了可疑菌落，（此處可貼圖放大展示）本期視頻就來(lái)繼續講解單增李斯特氏菌的生化鑒定，進(jìn)一步來(lái)確定可疑菌落是否為單增李斯特氏菌。
革蘭氏鏡檢：
挑取純培養的可疑菌落進(jìn)行革蘭氏鏡檢，單增李斯特氏菌為革蘭氏陽(yáng)性短桿菌。
生化實(shí)驗：
取一盒海博生物HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條，其中包含了單增李斯特氏菌的各項生化，除了5條生化鑒定條外，還包含一盒SIM生化管和一盒過(guò)氧化氫酶試劑。
（1）動(dòng)力實(shí)驗
取一支sim生化管或半固體生化管，挑取純培養的單個(gè)可疑菌落，穿刺于生化管中，之后置于25℃~30℃培養48h。李斯特氏菌有動(dòng)力，在半固體或SIM培養基上呈傘狀生長(cháng)，如傘狀生長(cháng)不明顯，可繼續培養5d，再觀(guān)察結果。
（2）過(guò)氧化氫酶實(shí)驗
用一次性接種針挑取單個(gè)可疑菌落，置于干凈的載玻片上（不可使用金屬接種環(huán)），在易折點(diǎn)處掰開(kāi)過(guò)氧化氫酶試劑，用移液槍吸取適量試劑，滴加在菌落上，30s內產(chǎn)生大量氣泡，為過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性。單增李斯特氏菌為陽(yáng)性反應。
（3）糖發(fā)酵試驗和MR-VP試驗
選擇過(guò)氧化氫酶為陽(yáng)性的純培養的菌落，接種至無(wú)菌生理鹽水管中，充分振蕩混勻制成均一的菌懸液，
取一支生化鑒定條，打開(kāi)蓋子，用酒精棉擦拭鑒定條表面及打孔器，依次打孔，用移液槍吸取待測菌菌懸液，每孔加入100ul，接種完畢后，蓋上蓋子，置于36℃±1℃培養。
培養結束后，在第7孔滴加甲基紅試劑，第8孔滴加VP試劑甲液3滴，乙液1滴放在記錄卡上觀(guān)察。進(jìn)行單增李斯特氏菌結果描述。
注意：vp實(shí)驗需要在滴加試劑后，4h內觀(guān)察結果。變紅為陽(yáng)性。
除了進(jìn)行上述生化實(shí)驗外，單增李斯特氏菌還需進(jìn)行溶血實(shí)驗，才能最終確定，敬請期待后續視頻！