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    濾膜法檢測產(chǎn)氣莢膜梭菌


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    亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(SPS)

    操作步驟:
    1、首先,將帶菌濾膜,用滅菌鑷子夾住其邊緣部分,帶菌的一面朝上,貼在培養基上。注意:濾膜往培養基上放置時(shí),應先讓其一邊的外緣接觸培養基,再輕輕松開(kāi)鑷子,讓濾膜沿著(zhù)先貼緊的部位逐漸與培養基接觸,直至全部貼緊。這樣貼的濾膜,中間不會(huì )有氣泡產(chǎn)生。
    2、將貼上濾膜的培養基平板,倒置放于厭氧培養裝置內,此處我們使用是的海博生物厭氧產(chǎn)氣包,厭氧培養袋和氧氣指示劑。打開(kāi)厭氧培養袋整理底部,將平板放入培養袋中,放入厭氧產(chǎn)氣包,掰開(kāi)氧氣指示劑,待兩分鐘后表層變藍,再將其置于厭氧培養袋中,將厭氧培養袋密封好。
    3、36℃厭氧培養24h后,如果濾膜上長(cháng)出黑色菌落,就初步懷疑是產(chǎn)氣莢膜梭菌,可以挑取這種菌落進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。
    原理解釋?zhuān)?/strong>
    產(chǎn)氣莢膜梭菌之所以能形成黑色菌落,是因為SPS培養基中含有亞硫酸鈉和檸檬酸鐵銨,產(chǎn)氣莢膜梭菌可還原亞硫酸鹽為硫化物,硫化物再與鐵反應生成黑色硫化鐵,從而使菌落中心呈現黑色;
    而其它雜菌不會(huì )長(cháng)出,是因為培養基中添加了多粘菌素B和磺胺嘧啶鈉,能有效抑制除梭菌外的其它雜菌的生長(cháng)。


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