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    培養基檢驗與驗收(二)非選擇性分離計數固體培養基的檢驗與驗收


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    非選擇性分離/計數固體培養基常用于細菌的計數、活化、分離純培養等用途,含瓊脂一般為1.2%-1.5%,培養基的組成為基礎營(yíng)養成分,無(wú)抑制性,一般不具有針對性,適用于大多數細菌的培養。
    培養基的出廠(chǎng)檢驗-生長(cháng)率測定
    1.菌液制備:將質(zhì)控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進(jìn)行活化培養(通?墒褂肨SB或TSA),使用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液進(jìn)行十倍系列稀釋至適宜梯度。
    2.培養基準備:將待測培養基及參比培養基按標簽制備進(jìn)行滅菌,制成平板備用(若采用傾注法接種,可將滅菌后的培養基置47-50℃水浴保溫備用)。細菌通常用TSA做參比培養基,真菌通常使用SDA,有特殊營(yíng)養要求的菌可選用適宜的無(wú)抑制性培養基做為參比培養基。
    3.接種及培養:吸取0.1mL制備好的菌懸液,分別涂布至待測培養基和參比培養基,每平板接種水平為20-200CFU,至少接種2塊平板,將接種好的培養基置于標準規定的條件下進(jìn)行培養。
    4.結果計算及判定:生長(cháng)率PR=NS(待測平板菌落總數)/NO(參比培養基平板菌落總數,應≥100CFU),目標菌在待測培養基上應有典型的生長(cháng),生長(cháng)率應不小于0.7。
    培養基的驗收方法
    將質(zhì)控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過(guò)夜培養制成工作菌懸液,使用1μL接種環(huán)挑取1環(huán)菌液,按照標準的方法連續劃16線(xiàn),置于標準規定的溫度培養,如果僅一半的線(xiàn)有稠密菌落生長(cháng),則G為0.5。如果劃線(xiàn)上沒(méi)有菌落生長(cháng)、生長(cháng)量少于劃線(xiàn)的一半或菌落生長(cháng)微弱,則G為0,計算G值總和,應達到G≥6。

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