生化試驗

  用已培養的營(yíng)養瓊脂斜面上生長(cháng)的菌苔，進(jìn)行生化試驗：即β-半乳糖苷酶、尿素、賴(lài)氨酸脫羧酶、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶、水楊苷、七葉苷、靛基質(zhì)、甘露醇、棉子糖和甘油。

附加生化實(shí)驗

  由于某些不活潑的大腸埃希氏菌（anaerogenic E.coli）、A-D（Alkalescens-D isparbiotypes堿性-異型）菌的部分生化特征與志賀氏菌相似，并能與某種志賀氏菌分型血清發(fā)生凝集；因此前面生化實(shí)驗符合志賀氏菌屬生化特性的培養物還需另加葡萄糖胺、西蒙氏檸檬酸鹽、粘液酸鹽試驗(36℃培養24 h～48 h)。

  可以使用海博生化鑒定試劑盒：HBIG04-1 HBI志賀氏菌生化鑒定條(GB)，需另購HB8279 Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒和GS070無(wú)菌液體石蠟。

  菌懸液法：取一支無(wú)菌生理鹽水試管，用接種環(huán)從營(yíng)養瓊脂斜面挑取菌落至無(wú)菌生理鹽水管中，充分振蕩混勻制成0.5麥氏濁度的均一細菌懸液(約109 CFU/mL)，打開(kāi)生化鑒定條的蓋子，用75%酒精擦拭打孔器，用打孔器開(kāi)孔或直接把膜撕掉；每孔加入100 μL菌懸液，其中固體和半固體生化管采用穿剌接種。賴(lài)氨酸、鳥(niǎo)氨酸和氨基酸對照需加滅菌石蠟覆蓋液面。接種完后做好標記，蓋上蓋子，放入底托中，放置36℃±1℃培養。培養結束后，放在記錄卡上觀(guān)察。

  靛基質(zhì)試驗需在培養結束后滴加靛基質(zhì)試劑，立即或數秒內出現玫紅色環(huán)為陽(yáng)性反應，黃色環(huán)為陰性反應。