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    培養基的檢驗與驗收(六)選擇性增菌培養基


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    在分離特定的目標菌時(shí),若樣品中存在較多的干擾菌,直接分離會(huì )比較困難,而選擇性增菌培養基的主要作用是盡可能抑制雜菌的生長(cháng),讓目標菌得到較多的增殖,逐漸稱(chēng)為優(yōu)勢群體,則可以很好的提高檢出率。本次就來(lái)講一下選擇性增菌培養基的檢驗與驗收方法。
    培養基的出廠(chǎng)檢驗
    本次以7.5%氯化鈉肉湯為例進(jìn)行講解
    1.混合菌的接種:在試管中接種10-100CFU的金黃色葡萄球菌和1000-5000CFU的大腸埃希氏菌,可將金黃色葡萄球菌制成約10-100CFU/mL的菌懸液,大腸埃希氏菌制成約10000-50000CFU/mL的菌懸液,吸取0.9mL金黃色葡萄球菌菌液及0.1mL大腸埃希氏菌菌液至7.5%氯化鈉肉湯中,金黃色葡萄球菌菌液可直接使用TSA傾注計數接種量,大腸埃希氏菌菌液需進(jìn)行百倍稀釋后,吸取1mL菌液用TSA傾注計數接種量。將接種后的培養基置36±1℃培養18-24h。
    2.非目標菌的接種:吸取1mL 1000-5000CFU/mL非目標菌菌懸液加入至待測培養基試管中,接種2支平行,置于標準中規定的條件下進(jìn)行培養。
    3.混合菌培養液的接種:用10μL接種環(huán)挑取1環(huán)培養后的7.5%氯化鈉肉湯混合菌測試管的培養液,劃線(xiàn)到Baird-parker瓊脂平板上,每支試管劃1個(gè)平板,36±1℃培養24-48h。
    4.非目標菌培養液的接種:吸取10μL經(jīng)培養后的非目標菌培養液,涂布或傾注法接種到非選擇性平板(如TSA)上。同時(shí)每管接種一個(gè)平板,并按標準規定的培養條件培養平板。
    5.結果判定:混合菌接種選擇性平板上的典型特征菌落數應>10CFU,非目標菌在非選擇性平板上菌落數應<100CFU。
    培養基的驗收方法
    將質(zhì)控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過(guò)夜培養,稀釋至10-3,也可采用其他方法制備含菌量105-107CFU/mL的菌懸液,使用1μL接種環(huán)挑取1環(huán)菌液,接種至待測培養基中,置于標準規定的條件進(jìn)行培養。
    結果判定:接種目標菌的試管濁度值應達到2,接種非目標菌的試管濁度應為0或1。

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