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    明膠液化實(shí)驗操作視頻


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    明膠生化管

    什么是明膠?
    明膠為從骨膠原而來(lái)的一種蛋白質(zhì),可溶于熱水,形成的溶液凝固點(diǎn)在20-30℃,低溫時(shí)呈固態(tài)狀不流動(dòng),超過(guò)30℃時(shí)呈液體狀。某些細菌具有明膠酶,可將明膠水解為多肽、氨基酸后失去凝膠性質(zhì),低溫下不再凝固。
    操作步驟:
    可使用溫水、培養箱或用手捂熱等方法將明膠生化管溫熱至大約30-40℃,培養基呈液體流動(dòng)狀,擺直立,打開(kāi)生化管,可用接種針或接種環(huán)挑取待測菌落穿刺接種或加入50-100μL的約109CFU/mL的菌懸液,纏上封口膜,置于36℃或其他適宜的條件下進(jìn)行培養。
    結果觀(guān)察:
    將生化管放入冰箱冷藏中10-20min或采用其他方法將培養基冷卻至10℃左右,傾斜生化管,觀(guān)察培養基是否能凝固。若培養基凝固不流動(dòng),說(shuō)明明膠未被分解液化,為陰性反應;若培養基不能凝固呈液體狀,說(shuō)明明膠已被水解,為陽(yáng)性反應。
    注意事項:
    (1)明膠在培養箱中和室溫較高時(shí)呈液態(tài)狀,因此觀(guān)察試驗結果時(shí),必須確保培養基已完全冷卻。
    (2)細菌液化明膠的時(shí)間存在差異,有些細菌可在18-24h液化,有些細菌需要3-7天甚至更長(cháng)時(shí)間才能液化,當出現陰性結果時(shí),應至少觀(guān)察一周。
    (3)明膠的凝固點(diǎn)在28℃左右,受運輸過(guò)程的溫度及震蕩影響,有可能出現培養基在管壁凝固形成不規則狀,此為正,F象,并非質(zhì)量問(wèn)題,使用前可用水浴或培養箱或其他方法溫育,使培養基呈液體流動(dòng)狀,擺直立即可。

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