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    腸桿菌科檢驗(一)樣品處理和分離操作


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    按照《GB 4789.41 食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 腸桿菌科檢驗》標準,食品中腸桿菌科細菌的檢驗有兩種方法。當樣品中目標菌含量較高時(shí),采用平板計數法,目標菌含量較低時(shí),則采用MPN法進(jìn)行檢驗計數。
    1、樣品處理
    兩種檢驗方法的樣品處理和稀釋?zhuān)耆嗤。都是?5g(mL)樣品,加入225mL的BPW中,進(jìn)行均質(zhì)。然后取均質(zhì)液進(jìn)行10倍系列稀釋。
    2、分離
    (1)平板計數法,是選擇2-3個(gè)適宜連續稀釋度的樣品勻液,各取1mL分別加入無(wú)菌培養皿內,用VRBGA進(jìn)行傾注后,36℃±1℃ 培養18 h~24 h,挑典型菌落劃線(xiàn)至NA平板,培養后進(jìn)一步鑒定。
    (2)MPN法,是選擇3個(gè)適宜連續稀釋度的樣品勻液,每個(gè)稀釋度加入3管BPW試管中,共9管 BPW,置于 于 36℃ ±1℃ 培養 18h±2h。
    然后,從每支試管中,分別吸取1mL增菌液,加入10mLEE肉湯管,EE肉湯管編號與BPW一一對應。36℃±1℃ 培養 24 h±2 h。
    從每支EE肉湯管中分別取1環(huán)培養物,劃線(xiàn)接種于VRBGA平板,36℃±1℃培養24 h±2 h,觀(guān)察平板上有無(wú)典型菌落。挑典型菌落劃線(xiàn)至NA平板,培養后進(jìn)一步鑒定。
    兩種方法分離出的典型菌落,均不能直接進(jìn)行計數,尚需進(jìn)一步鑒定確認后,才能按相關(guān)方法進(jìn)行計數。有關(guān)腸桿菌科細菌鑒定方法、結果判定和計數方法等內容,待后續視頻講解。
    注意事項:
    (1)MPN法中,每個(gè)試管都要有唯一編號,且編號與平皿上的編號一致,避免混淆。
    (2)有關(guān)計數:VRBGA上的可疑菌必須經(jīng)過(guò)進(jìn)一步鑒定確認后,才能進(jìn)行計數。

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