一、增菌

1、將1支HB8663a新生霉素加入1袋HBJ8663含225ml志賀氏菌增菌肉湯均質(zhì)袋中，混勻。

2、以無(wú)菌操作取檢樣25 g（mL），加入裝有225 mL志賀氏菌增菌肉湯的均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器連續均質(zhì)1 min～2 min，液體樣品振蕩混勻即可。

3、放入厭氧培養袋中，加入厭氧產(chǎn)氣包于41.5℃±1℃，厭氧培養16 h～20 h。

二、分離

1、操作步驟： 取增菌后的志賀氏增菌液分別劃線(xiàn)接種于XLD瓊脂平板和MAC瓊脂平板或志賀氏菌顯色培養基平板上，于36℃±1℃培養20 h～24 h，觀(guān)察各個(gè)平板上生長(cháng)的菌落形態(tài)。

2、結果觀(guān)察：

  （1）MAC瓊脂：無(wú)色至淺粉紅色，半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊

  （2）XLD瓊脂：粉紅色至無(wú)色，半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊