MUG培養基

操作步驟：
1.取細菌的新鮮培養物，用接種環(huán)接種于生理鹽水管中，振蕩混勻。
2.按照10倍系列稀釋法制備菌液，取接種量為10-100cfu的菌懸液，進(jìn)行試驗。
3. 用移液槍吸取100μL稀釋好的菌液接種到MUG培養基管中，接種兩個(gè)平行管，同時(shí)吸取100μL生理鹽水接種到MUG培養基管中作為空白對照。
4. 相同的方法接種其他菌株，之后放置于30-35℃培養5-24小時(shí)。

結果觀(guān)察：
發(fā)現接種大腸埃希氏菌和陰溝腸桿菌的試管變渾濁。而接種金黃色葡萄球菌的試管為澄清狀態(tài)。

葡萄糖醛酸苷酶檢測：
在黑暗環(huán)境中，使用366nm紫外燈照射培養后的試管，發(fā)現接種兩株大腸埃希氏菌的試管均產(chǎn)生藍白色熒光，這是因為MUG的β-糖醛酸苷鍵被大腸埃希氏菌產(chǎn)生的葡萄糖醛酸苷酶水解，釋放出4-甲基傘形酮，4-甲基傘形酮在紫外燈下可產(chǎn)生藍白色熒光。
而接種陰溝腸桿菌和金黃色葡萄球菌的培養管無(wú)藍白色熒光，說(shuō)明這兩株菌不能產(chǎn)生葡萄糖醛酸苷酶。

靛基質(zhì)試驗：
向培養后的試管滴加Kovacs靛基質(zhì)試劑2-3滴，立即觀(guān)察結果，也可以放置室溫5-10min觀(guān)察結果。發(fā)現接種兩株大腸埃希氏菌的試管均有紅色環(huán)產(chǎn)生，這是因為蛋白胨中的色氨酸被大腸埃希氏菌產(chǎn)生的色氨酸酶分解，形成靛基質(zhì)。靛基質(zhì)與Kovacs靛基質(zhì)試劑反應，形成紅紫色醌式化合物，即紅色環(huán)。
而陰溝腸桿菌和金黃色葡萄球菌培養管有黃色環(huán)，說(shuō)明這兩株菌均不含有色氨酸酶。