支原體肉湯培養基

肺炎支原體的靈敏度試驗采用支原體肉湯培養基進(jìn)行培養，主要的步驟包括：實(shí)驗物品準備及滅菌，添加血清，調節培養基pH，接種肺炎支原體。本視頻詳細講解了實(shí)驗的具體過(guò)程以及如何有效避免污染的操作方法，希望對您有所幫助。
1.培養基的配制及物品的準備：將陶瓷缸、試管使用蒸餾水沖洗干凈備用，配制海博支原體肉湯培養基于陶瓷缸中溶解完全，分裝試管，每管8 mL，塞上膠塞。之后將培養基、碳酸鈉溶液、移液槍頭包好，于121℃滅菌鍋中滅菌15分鐘。
2.燒試管口：滅菌結束后，待培養基冷卻至室溫后，對每支試管灼燒管口，將管口水分烤干，可有效防止污染，膠塞也需過(guò)火。此后操作過(guò)程中，只要試管進(jìn)行了震蕩操作，特別是震蕩過(guò)程中有液體接觸到試管口處的膠塞，均需再次燒口。
3.添加血清：向每支試管中添加2 mL的血清，震蕩均勻。
4.調節pH：取三支試管使用碳酸鈉調節pH至7.4~7.8，本次確定碳酸鈉平均添加量為0 μL。因此無(wú)需添加碳酸鈉即可進(jìn)行下一步操作（注意：均使用滅菌后的碳酸鈉以避免誤差）。
5.接種肺炎支原體：接種肺炎支原體于培養基中混合均勻記為-1，并做梯度稀釋至-9，設兩支未接種的培養基為陰性對照管。使用封口膜封口，之后放置于36℃±1℃的培養箱中培養7-14天。
6.結果觀(guān)察：培養第9天，靈敏度為9。