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    創(chuàng )傷弧菌的初步檢測


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    3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂

    實(shí)驗操作:
    1、樣品制備:按照標準進(jìn)行取樣。
    2、增菌:按標準方法進(jìn)行增菌,培養后PNCC增菌液混濁。
    3、分離:用10 μL接種環(huán)在距離PNCC增菌液的液面下1 cm沾取一環(huán)增菌液,分別劃線(xiàn)接種于CC和mCPC平板,于36℃±1℃條件下培養18 h±1 h。
    典型的創(chuàng )傷弧菌可以發(fā)酵纖維二糖產(chǎn)酸使培養基變黃,所以在CC和mCPC平板上的形態(tài)為:圓形、扁平,中心不透明但邊緣透明的黃色菌落
    4、分純培養
    從CC平板和mCPC平板上各挑取至少5個(gè)創(chuàng )傷弧菌可疑菌落,分別接種于3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂平板上,36℃±1℃培養18 h±1 h后用于后續鑒定。
    創(chuàng )傷弧菌在3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂平板上應為:直徑1 mm~2 mm,圓形、乳白色菌落。

    結果觀(guān)察:
    挑取分純后的同一個(gè)單菌落,進(jìn)行以下4項鑒定實(shí)驗。
    革蘭氏染色鏡檢 、氧化酶試驗 、三糖鐵試驗 、嗜鹽性試驗(革蘭氏染色和氧化酶實(shí)驗詳見(jiàn)往期視頻)
    ①革蘭氏染色鏡檢:革蘭氏陰性,棒狀、弧狀、卵圓狀等多種形態(tài),無(wú)芽胞。
    ②氧化酶試驗:氧化酶試紙變藍,為陽(yáng)性。
    ③三糖鐵試驗:挑取純化后的同一個(gè)單菌落,劃線(xiàn)接種于3%氯化鈉三糖鐵瓊脂斜面并穿刺底層,36℃±1℃培養24 h,觀(guān)察結果。試管底層變黃,無(wú)氣泡,斜面顏色不變黃。
    ④嗜鹽性試驗:挑取純化后的同一個(gè)單菌落分別接種于含有0%、3%、6%、8%、和10%氯化鈉的胰蛋白胨水中,36℃±1℃培養24 h,觀(guān)察液體的混濁情況。
    創(chuàng )傷弧菌在含有0%、8%、和10%氯化鈉的胰蛋白胨水中不生長(cháng)或微弱生長(cháng),胰蛋白胨水澄清透亮或稍混濁,而在3%和6%氯化鈉的胰蛋白胨水中生長(cháng)旺盛,胰蛋白胨水混濁。


    后續還需要進(jìn)行確證鑒定進(jìn)行進(jìn)一步確認,敬請期待后續視頻!



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