CIN-1培養基基礎

小腸結腸炎耶爾森氏菌（Yersinia enterocolitica），簡(jiǎn)稱(chēng)小腸耶爾森氏菌，是革蘭氏陰性桿菌或球桿菌。本菌不形成芽胞，無(wú)莢膜，有鞭毛；但其鞭毛在30℃以下培養條件形成，溫度較高時(shí)即喪失，因此表現為30℃以下有動(dòng)力，而35℃以上則無(wú)動(dòng)力。該菌是能在冷藏溫度下生長(cháng)的少數幾種腸道致病菌之一，在4℃條件下能保存和繁殖。
1. 分離：用接種環(huán)取乳與乳制品增菌液或經(jīng)過(guò)堿處理的其他食品增菌液分別劃線(xiàn)接種于CIN-1瓊脂平板和改良Y瓊脂平板，26℃±1℃培養48 h±2 h。典型菌落在CIN-1上為深紅色中心，周?chē)�具有無(wú)色透明圈（紅色牛眼狀菌落），菌落大小為1 mm~2 mm，在改良Y瓊脂平板上為粉紅色透明、不黏稠的菌落。
2. 改良克氏雙糖試驗：分別從選擇性平板挑取可疑菌落3個(gè)~5個(gè)，接種于改良克氏雙糖鐵瓊脂，先在斜面劃線(xiàn)，再于底層穿刺，26℃±1℃培養24 h，選擇斜面和底部皆變黃且不產(chǎn)氣的培養物做進(jìn)一步的生化鑒定。
3. 尿素酶試驗和動(dòng)力觀(guān)察：用接種環(huán)挑取一滿(mǎn)環(huán)可疑培養物，接種到尿素培養基中，接種量應足夠大，振搖幾秒鐘，26℃±1℃培養2 h~4 h。將尿素酶試驗陽(yáng)性菌落分別接種于兩管半固體培養基中，于26℃±1℃和36℃±1℃培養24 h。將在26 ℃有動(dòng)力而36℃無(wú)動(dòng)力的可疑菌培養物劃線(xiàn)接種營(yíng)養瓊脂平板，進(jìn)行純化培養，用純化物進(jìn)行后續的鑒定。
4. 革蘭氏染色鏡檢 ：將純化的可疑菌進(jìn)行革蘭氏染色。小腸結腸炎耶爾森氏菌呈革蘭氏陰性球桿菌，有時(shí)呈橢圓或桿狀，大小為（0.8 μm~3.0 μm）×0.8 μm。
5. 生化鑒定：打開(kāi)V-P生化管，用接種針從純化平板上挑取單個(gè)菌落接種至生化管中，相同方法接種其他生化管，氨基酸生化管需要加入100 μL無(wú)菌石蠟覆蓋，放置于26℃±1℃培養。 小腸結腸炎耶爾森氏菌的主要生化特征：V-P試驗陽(yáng)性，鳥(niǎo)氨酸脫羧酶+，蔗糖+（有不同的生化型），棉子糖-，山梨醇+，甘露醇+，鼠李糖-。