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    培養基的檢驗與驗收(八)鑒定類(lèi)培養基的制備方法


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    鑒定類(lèi)培養基的介紹

      鑒定類(lèi)培養基一般用于檢驗微生物一項或多項生化特性,許多分離類(lèi)的培養基同時(shí)也具有鑒定效果,也被稱(chēng)為分離鑒別培養基。
      鑒定培養基按狀態(tài)可分為液體、固體、半固體,使用時(shí)配制的方法也不相同。
    配制方法
    1、液體類(lèi)鑒定培養基:
      按照標簽說(shuō)明進(jìn)行稱(chēng)量,之后不停攪拌均勻,直至完全溶解至無(wú)顆粒狀,然后用移液槍分裝于試管中,包扎好后拿去滅菌。
      需要觀(guān)察產(chǎn)氣的,例如硝酸鹽胨水培養基,需要在試管中放入倒管,滅菌后要進(jìn)行排氣;
      需厭氧的,例如甘露醇發(fā)酵培養基,可在培養基上方覆蓋約3mm厚的液體石蠟。
    2.半固體類(lèi)培養基:
      此類(lèi)培養基中通常含有少量的瓊脂,稱(chēng)量并攪拌至無(wú)顆粒后,需先加熱煮沸溶解均勻,再用移液管分裝于試管中,包扎好拿去滅菌
      滅菌后擺直立,待凝固后備用
    3.固體類(lèi)培養基:
      此類(lèi)培養基中因含有瓊脂,在滅菌前也需要進(jìn)行加熱煮沸,配制方式一般有倒平板、擺直立、擺長(cháng)斜面和高層斜面這四種方式。
      ①倒平板
      按照配制方法,將滅菌后冷卻至50℃左右的完全培養基傾入無(wú)菌平皿即可,需要觀(guān)察透明圈等現象的培養基,例如酪蛋白瓊脂、血平板等
      傾注平板不宜過(guò)厚。
      ②擺長(cháng)斜面
      對于需要觀(guān)察需氧條件下的單項生化反應的培養基,如尿素酶瓊脂、西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂等,滅菌后一般擺成長(cháng)斜面(斜面:底層≈3:2,底層也可以更短,主要起固定作用)。
      ③擺高層斜面
      對于需要同時(shí)觀(guān)察有氧和缺氧部分生化反應結果的培養基,如三糖鐵瓊脂、克氏雙糖鐵瓊脂等,滅菌后需擺高層斜面(斜面:底層≈2:3),注意:試管塞必須具有良好的透氣性。

    配制小貼士:滅菌和分裝的順序
      可完全滅菌的培養基,通常建議先加熱溶解分裝,再進(jìn)行滅菌處理。對于滅菌后還需添加不穩定成分的培養基,則需先滅菌,冷卻后加入不穩定成分,再分裝至無(wú)菌器皿。
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