石蕊牛奶培養基

實(shí)驗原理：
牛奶中主要含有乳糖、酪蛋白等成分。細菌對牛奶的利用主要是指對乳糖和酪蛋白的分解和利用。牛奶中加入石蕊作為酸堿指示劑和氧化還原指示劑，石蕊中性時(shí)呈淡紫色，酸性時(shí)呈紅色，堿性時(shí)呈藍色，還原時(shí)則部分或全部脫色。

細菌對牛奶的利用可分為以下幾種情況：
1. 酸凝固作用：細菌發(fā)酵乳糖后，產(chǎn)生很多酸，使石蕊牛奶變紅，當酸度很高時(shí)，可使牛奶凝固，此稱(chēng)為酸凝固。
2. 胨化作用：酪蛋白被水解，使牛奶變成清亮透明的液體。胨化作用可以在酸性或堿性條件下進(jìn)行，一般石蕊被還原褪色。
3. 凝乳酶凝固作用：某些細菌能分泌凝乳酶，使牛奶中的酪蛋白凝固。
4. 有些細菌可以分解培養基中的酪蛋白，產(chǎn)生堿性物質(zhì)，使石蕊變藍。

細菌對牛奶的利用可分為以下幾種情況：
1. 用待試菌18-24h培養物進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)�用接種環(huán)從培養平板上挑取菌落于9ml 0.85%生理鹽水試管中，振蕩試管，混合均勻，制成原液。
2. 用移液槍吸取1中樣品勻液 1 mL，沿管壁緩慢注于盛有 9 mL 生理鹽水試管中，振搖試管使其混合均勻，制成 1:10的樣品勻液。
3. 按上述操作程序，制備菌落數大于5000CFU的稀釋菌液。
4. 將稀釋菌液加入石蕊牛奶試管中，于37℃培養箱培養48h。

結果判定：
接種大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌的試管：粉色，凝固，為酸凝固作用；

接種枯草芽孢桿菌的試管：變清，為胨化作用；

接種嗜熱鏈球菌的試管：凝固，為凝乳酶凝固作用；

接種糞產(chǎn)堿桿菌的試管：分解酪蛋白產(chǎn)堿，變藍；

接種唐菖蒲霍爾德氏菌的試管：上層為紫色，下層為白色。