1.樣品采集后應盡快檢驗，若不能及時(shí)檢驗，可在2℃～5℃保存；如8 h內不能進(jìn)行檢驗，應以無(wú)菌操作稱(chēng)取25 g（mL）樣品加入等量緩沖甘油-氯化鈉溶液（液體樣品應加雙料），并盡快至于-60℃低溫冰箱中冷凍保存或加干冰保存。
注意事項：產(chǎn)氣莢膜梭菌為厭氧菌，暴露在空氣中易死亡，因此從稱(chēng)樣、制備樣液、稀釋、到傾注培養基進(jìn)行培養整個(gè)過(guò)程要快速完成，如不能及時(shí)完成，可按標準要求置于2-5℃保存(數小時(shí)內)或加入緩沖-甘油氯化鈉溶液置于-60℃冷凍保存。
2.以無(wú)菌操作稱(chēng)取25 g（mL）樣品放入含有225 mL 0.1%蛋白胨水（如為1中冷凍保存樣品，室溫解凍后，加入200 mL 0.1%蛋白胨水）的均質(zhì)袋中，在拍擊式均質(zhì)器上連續均質(zhì)1 min～2 min；或置于盛有225 mL0.1%蛋白胨水的均質(zhì)杯中，8 000 r/min～10 000 r/min均質(zhì)1 min～2 min，作為1:10稀釋液。
3.以上述1:10稀釋液按1 mL加0.1%蛋白胨水9 mL制備10-2～10-6的系列稀釋液。
4.吸取各稀釋液1 mL加入無(wú)菌平皿內，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平行。每個(gè)平皿傾注冷卻至50℃的TSC瓊脂（可放置于50 ℃±1 ℃恒溫水浴箱中保溫）15 mL，緩慢旋轉平皿，使稀釋液和瓊脂充分混勻。
注意事項：注意傾注時(shí)的培養基溫度和時(shí)間，培養基溫度過(guò)高或操作時(shí)間過(guò)長(cháng)都有可能導致產(chǎn)氣莢膜梭菌死亡;
5.上述瓊脂平板凝固后，再加10 mL冷卻至50℃的TSC瓊脂（可放置于50℃±1℃恒溫水浴箱中保溫）均勻覆蓋平板表層。
注意事項：部分產(chǎn)氣莢膜梭菌若生長(cháng)在培養基表面時(shí)會(huì )因產(chǎn)生的硫化氫逃逸，菌落呈現無(wú)色，導致漏檢，覆蓋培養基則可以留住硫化氫與培養基中的鐵鹽反應生成黑色的FeS，使菌落呈現黑色，因此必須要進(jìn)行覆蓋操作。
6.待瓊脂凝固后，正置于厭氧培養裝置內，36℃±1℃培養20 h～24 h。
7.典型的產(chǎn)氣莢膜梭菌在TSC瓊脂平板上為黑色菌落。