一、復發(fā)酵
首先將復發(fā)酵試驗中，渾濁產(chǎn)氣的LST肉湯管逐一編號① ②......
再取兩支EC肉湯管，與LST管對應編號① ②......并設置一支空白對照。
注意：若小倒管內有氣體，則需先將倒管內的氣體排出，再進(jìn)行接種操作。
之后將LST管振蕩混勻，用無(wú)菌接種環(huán)，分別從每個(gè)LST管中取一環(huán)菌液，接入對應編號的EC肉湯管中；每換1管，需將接種環(huán)灼燒，保證無(wú)菌。
接種完畢后將培養箱溫度設置為44.5℃，將其放置于培養箱中，培養24-48h。
培養結束后，挑選渾濁產(chǎn)氣的EC肉湯管，進(jìn)行后續的分離操作。
二、分離操作
將渾濁產(chǎn)氣的EC肉湯管混勻，取一環(huán)菌液，劃線(xiàn)至EMB平板（每個(gè)EMB平板編號與EC肉湯管編號對應）；同時(shí)劃線(xiàn)標準陽(yáng)性菌大腸埃埃希氏菌，同步培養作為對照。36℃培養18-24h。
三、結果觀(guān)察
EMB平板上長(cháng)出的黑色、有金屬光澤的菌落，即為可疑的大腸埃希氏菌。后續可挑取這類(lèi)菌落進(jìn)一步純化、鑒定，以確認是否為大腸埃希氏菌。