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    副溶血性弧菌的生化鑒定


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    HBI副溶血性弧菌生化鑒定條

    實(shí)驗步驟:
    1.挑取純培養的單菌進(jìn)行革蘭氏染色及氧化酶試驗,副溶血性弧菌為革蘭氏陰性菌,氧化酶陽(yáng)性實(shí)驗結果(具體實(shí)驗操作詳見(jiàn)海博官網(wǎng))。
    2.之后,用接種針從平板上挑取部分菌落至2 ml無(wú)菌生理鹽水試管中,充分振蕩,制成0.5麥氏濁度的均一細菌懸液。
    3.取一支無(wú)污染的海博生物副溶血性弧菌生化鑒定條,用酒精棉擦拭打孔器,依次打孔,用移液槍吸取100 μl菌懸液,依次加入每個(gè)孔中。其中VP半固體需采用穿刺接種:用接種針挑取純培養的單菌落,穿刺接種于生化管中。賴(lài)氨酸和氨基酸對照則需覆蓋滅菌液體石蠟:取一支無(wú)菌液體石蠟,掰開(kāi)安瓿瓶,用移液槍吸取適量液體石蠟,覆蓋表層。
    4.接種完后做好標記,蓋上蓋子,放置36℃±1℃培養24h。
    結果觀(guān)察:
    培養結束后,在記錄卡上觀(guān)察實(shí)試驗結果。
    副溶血性弧菌應為
    無(wú)鹽胰胨水和10%氯化鈉胰胨水陰性,不生長(cháng);6%? 8%氯化鈉胰胨水呈陽(yáng)性,生長(cháng);
    氨基酸對照黃色;賴(lài)氨酸脫羧酶陽(yáng)性,紫色;甘露醇陽(yáng)性,變黃;
    VP半固體:動(dòng)力陽(yáng)性;加入vp試劑混勻后4h內不變色,為vp陰性;
    ONPG陰性,不變色。

    注意事項:
    V-P試驗過(guò)程中,在培養結束后需加VP試劑(甲液:0.3ml,乙液:0.1ml),混勻后4 h內觀(guān)察結果。


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