硝酸鹽還原(生化管)

所需試劑：
1、硝酸肉湯生化管：有GB033、SN047、GB182等多種配方，適用于不同細菌的硝酸鹽還原試驗，可根據具體需要選用。本視頻以GB033為例介紹。
2、GB129硝酸鹽（產(chǎn)氣）：用于細菌的硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗。
3、HB8282硝酸鹽還原試劑盒：與硝酸鹽肉湯配套使用，用于結果觀(guān)察。
試驗菌的接種：
1、GB033：打開(kāi)安瓿瓶，接種試驗菌，36±1℃培養18-24h。
2、GB129：使用前需將小倒管中氣體排出，打開(kāi)管蓋，接種試驗菌，36±1℃培養20-24h，注意專(zhuān)性需氧菌培養時(shí)不能將管蓋擰緊。

結果判斷及原理：
1、GB033：接種試驗菌培養后的硝酸鹽肉湯需滴加硝酸鹽還原試劑來(lái)檢驗硝酸鹽是否被利用生成亞硝酸鹽。
①若試驗菌利用硝酸鹽生成亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與試劑反應生成紅色物質(zhì)，則滴加試劑后呈紅色（陽(yáng)性）；
②若試驗菌利用硝酸鹽生成氨，則滴加試劑為無(wú)色，此時(shí)繼續加入適量鋅粉，仍不變紅，證明培養物中無(wú)硝酸鹽的存在（全部被利用），硝酸鹽還原試驗依然判為陽(yáng)性；
③若試驗菌不利用硝酸鹽，則滴加試劑為無(wú)色，繼續加入鋅粉后溶液變紅，證明硝酸鹽未被利用，結果判定為陰性。
2、GB129：若試驗菌利用硝酸鹽生成氮氣，則小倒管中囤積氣體，判定為陽(yáng)性；小倒管中無(wú)氣體，則判定為陰性。

鋅粉的作用：
鋅粉可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽繼續與硝酸鹽還原試劑發(fā)生紅色反應因此可以用鋅粉來(lái)檢驗培養基中是否還含有硝酸鹽，從而幫助判斷反應的陰陽(yáng)性。

注意事項：
某些細菌利用硝酸鹽緩慢可延長(cháng)時(shí)間培養，結果為陽(yáng)性依然可判定為硝酸鹽還原陽(yáng)性。