弧菌顯色培養基（第二代）

  弧菌顯色培養基是青島海博生物公司改良的培養基，用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測。副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創(chuàng )傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色；其它細菌絕大部分被抑制。本培養基的特異性高，可以克服TCBS培養基引起的假陰性結果，是一種很理想的快速檢測培養基。
成份(g/L)
 

此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養成份以獲得最佳的結果。 

用法

  稱(chēng)取本品 18.9g 加入 200ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸3-5次。冷卻至 45-50℃ 時(shí)，傾入無(wú)菌平皿。
 注意：制備好的培養基表面不能太干燥。

原理
  利用弧菌自身代謝產(chǎn)生的酶與相應顯色底物反應使菌落顯色，以區分目標菌與非目標菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶作用下，游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
  1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液；
  2、取 1ml 樣品液加入 9ml SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中，36±1℃ 增菌培養 18-24 小時(shí)；
  3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線(xiàn)接種到弧菌顯色培養基上，做 2 個(gè)平板；
  4、36±1℃培養 18-24h，副溶血性弧菌顯藍綠色，菌落比較大；霍亂弧菌和創(chuàng )傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色，其它細菌絕大部被抑制；
  5、對可疑菌落可劃線(xiàn)接種到營(yíng)養瓊脂平板上，36±1℃ 培養 12-16 小時(shí)，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗。

質(zhì)量控制
  1、外觀(guān)

  此干燥培養基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈淡黃色。制備好的平板呈淡粉色至黃色固體培養基。
 2、微生物試驗
  在36±1℃培養18-24h小時(shí)

方法的局限性
  本培養基不能直接鑒定霍亂弧菌，副溶血性弧菌的特異性可達 95%，準確性非常高，有時(shí)可能需做其它補充試驗。
典型特征
  典型副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創(chuàng )傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色

貯存
  制備好的平板可保存 2-5 天，應避免光線(xiàn)直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。
失效
  干燥培養基超過(guò)保質(zhì)期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意
  此培養基僅供實(shí)驗室使用。
參考文獻
  1、Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS(modified Nakanishi's agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.
  2、Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.
  3、Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott's diagnostic microbiology, 9 th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, MO.

相關(guān)資料：

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弧菌顯色培養基（第二代）原理和使用方法 點(diǎn)擊查看

操作視頻｜副溶血性弧菌的初步檢測-點(diǎn)擊查看實(shí)驗操作視頻