一、試驗原理:
弧菌顯色培養基是青島海博生物公司改良的培養基,用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測。副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大,霍亂弧菌和創(chuàng )傷弧菌顯紫紅色,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色,其它細菌絕大部分被抑制。本培養基的特異性高,可以克服TCBS培養基引起的假陰性結果,是一種很理想的快速檢測培養基。
弧菌自身代謝產(chǎn)生的酶與相應顯色底物反應使菌落顯色,以區分目標菌與非目標菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色因子使弧菌菌落顯示相應的顏色。
二、培養基配方(g/L):
特殊營(yíng)養物質(zhì) |
75.0 |
混合顯色劑 |
4.45 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值8.6±0.1(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱(chēng)取本品18.9g加入200mL蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸3-5次。冷卻至45℃-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿。注意:制備好的培養基表面不能太干燥。
2. 10倍梯度稀釋法制備目標菌菌懸液,吸取合適梯度的菌懸液涂布接種于待測培養基和參比培養基上。
3. 非目標菌(特異性)定性測試,接種環(huán)取一環(huán)質(zhì)控菌株培養液劃線(xiàn)接種至待測平板上。
4. 放置于恒溫培養箱36℃±1℃需氧培養18h-24h,觀(guān)察試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質(zhì)控菌株,放置于36℃±1℃需氧培養18h-24h,試驗結果如圖1所示。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質(zhì)控結果 |
其他特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC 17802 |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
藍綠色,菌落比較大 |
溶藻弧菌 |
ATCC 17749 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
淡黃色或米黃色 |
霍亂弧菌 |
非O1群 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
紫紅色 |
創(chuàng )傷弧菌 |
ATCC 27562 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
紫紅色 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
圖1 弧菌顯色培養基(第二代)微生物質(zhì)控結果
注:A:副溶血性弧菌;B:溶藻弧菌;C:霍亂弧菌;D:創(chuàng )傷弧菌;E:金黃色葡萄球菌;F:大腸埃希氏菌
相關(guān)產(chǎn)品:
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。