試劑盒組成：
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組成
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別名
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規格
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配制依據
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溶液A
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結晶紫染色液
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5ml*2
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將1.0g結晶紫完全溶解于20ml 95%乙醇，
然后與80ml 1%草酸銨水解液混合。
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溶液B
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碘液
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5ml*2
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將1.0g碘與2.0g碘化鉀混合，然后加少許
蒸餾水充分振搖，待完全溶解，再加蒸餾水至300ml。
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溶液C
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95%乙醇
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5ml*2
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/
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溶液D
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沙黃復染液
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5ml*2
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將0.25g沙黃溶解于10ml95%乙醇中，然后
加90ml蒸餾水稀釋。
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檢驗原理：
通過(guò)結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí)，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類(lèi)脂，故乙醇處理不會(huì )出現縫隙，因此，能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類(lèi)脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類(lèi)脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過(guò)乙醇脫色后仍呈無(wú)色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
用法：
1.涂片經(jīng)火焰固定，加（結晶紫溶液）溶液A染1分鐘，用清水沖去染液。
2.加（碘液）溶液B染1分鐘，水洗。
3.加（95%乙醇）溶液C，不時(shí)搖動(dòng)玻片約10-30秒，至無(wú)紫色脫落為止，水洗。
4.加（沙黃復染液）溶液D，染1分鐘，水洗。
5.干后油鏡鏡檢。陽(yáng)性菌呈紫色、陰性菌呈淡紅色。
革蘭氏染色液質(zhì)控結果：
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大腸埃希氏菌O157:H7 ATCC35150
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金黃色葡萄球菌ATCC25923
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革蘭氏染色液試劑盒微生物靈敏度試驗：
按標簽用法制備培養基，接種以下質(zhì)控菌株，放置/℃/培養/小時(shí)。
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