食品衛生微生物檢驗實(shí)驗室操作要求（下）

  四、有毒有菌污物處理要求

    微生物實(shí)驗所用實(shí)驗器材、培養物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實(shí)驗室。

    1. 經(jīng)培養的污染材料及廢棄物應放在嚴密的容器或鐵絲筐內，并集中存放在指定地點(diǎn)，待統一進(jìn)行高壓滅菌。

    2. 經(jīng)微生物污染的培養物，必須經(jīng)121℃30min高壓滅菌。

    3. 染菌后的吸管，使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡24h（消毒液體不得低于浸泡的高度）再經(jīng)121℃30 min高壓滅菌。

    4. 涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中，經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24 h后，煮沸洗滌。做凝集試驗用的玻片或平皿，必須高壓滅菌后洗滌。

    5. 打碎的培養物，立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時(shí)后再擦拭干凈。

    污染的工作服或進(jìn)行烈性試驗所穿的工作服、帽、口罩等，應放入專(zhuān)用消毒袋內，經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。

 

    五、培養基制備要求

    培養基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長(cháng)。因為各種微生物對其營(yíng)養要求不完全相同，培養目的的不同，各種培養基制備要求如下：

    1．根據培養基配方的成分按量稱(chēng)取，然后溶于蒸餾水中，在使用前對應用的試劑藥品應進(jìn)行質(zhì)量檢驗。

    2．PH測定及調節：PH測定要在培養基冷至室溫時(shí)進(jìn)行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當測定好時(shí)，按計算量加入堿或酸混勻后，應再測試一次。培養基PH值一定要準確，否則會(huì )影響微生物的生長(cháng)或影響結果的觀(guān)察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過(guò)高或次數太多，以免影響培養基的質(zhì)量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調完P(guān)H后再加入。

    3．培養基需保持澄清，便于觀(guān)察細菌的生長(cháng)情況，培養基加熱煮沸后，可用脫脂棉花或絨布過(guò)濾，以除去沉淀物，必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理，所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用，避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。

    4．盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器，使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。

    5．培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的，又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養價(jià)值，一般121℃15min即可，如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養基如糖類(lèi)、血清、明膠等，則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌，一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等，待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。

    6．每批培養基制備好后，應做無(wú)菌生長(cháng)試驗及所檢菌株生長(cháng)試驗。如果是生化培養基，使用標準菌株接種培養，觀(guān)察生化反應結果，應呈正常反應，培養基不應貯存過(guò)久，必要時(shí)可置4℃冰箱存放。

    7．目前各種干燥培養基較多，每批需用標準菌株進(jìn)行生長(cháng)試驗或生化反應觀(guān)察，各種培養基用相應菌株生長(cháng)試驗良好后方可應用，新購進(jìn)的或存放過(guò)久的干燥培養基，在配制時(shí)也應測PH，使用時(shí)需根據產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)用量和方法進(jìn)行。

    8．每批制備的培養基所用化學(xué)試劑、滅菌情況及菌株生長(cháng)試驗結果、制作人員等應做好記錄，以備查詢(xún)。

 

    六、樣品采集及處理要求

    1．所采集的檢驗樣品一定要具有代表性，采樣時(shí)應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周?chē)�環(huán)境衛生狀況等進(jìn)行詳細調查，檢查是否有污染源存在。

    2．根據食品的種類(lèi)及數量，采樣數量及方法應按標準檢驗方法的要求進(jìn)行。

    3．采樣應注意無(wú)菌操作，容器必須滅菌，避免環(huán)境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌，更不能含有此類(lèi)消毒藥物或抗生素類(lèi)藥物，以避免殺死樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應用。

    4．樣品采集后應立即送往檢驗室進(jìn)行檢驗，送檢過(guò)程中一般不超過(guò)3h，如路程較遠，可保存在1～5℃環(huán)境中，如需冷凍者，則在凍存狀態(tài)下送檢。

    5．檢驗室收到樣品后，進(jìn)行登記（樣品名稱(chēng)、送檢單位、數量、日期、編號等），觀(guān)察樣品的外觀(guān)，如果發(fā)現有下列情況之一者，可拒絕檢驗。

    (1) 樣品經(jīng)過(guò)特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者，失去代表原食品檢驗意義者。

    (2) 瓶、袋裝食品已啟開(kāi)者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形狀者（食物中毒樣品除外）。

    (3) 按規定采樣數量不足者。

    對送檢符合要求的樣品，檢驗室收到后，應立即進(jìn)行檢驗，如果條件不具備，應置4℃冰箱存放，及時(shí)準備創(chuàng )造條件，然后進(jìn)行檢驗。

    6．樣品檢驗時(shí)，根據其不同性狀，進(jìn)行適當處理。

    (1) 液體樣品接種時(shí)，應充分混合均勻，按量吸取進(jìn)行接種。

    (2) 固體樣品，用滅菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中，用均質(zhì)器攪碎混勻后，按量吸取接種。

    (3) 瓶、袋裝食品應用滅菌操作啟開(kāi)，根據性狀選擇上述方法處理后接種。

 

    七、樣品檢驗、記錄和報告的要求

    1．檢驗室收到樣品后，首先進(jìn)行外觀(guān)檢驗，及時(shí)按照國家標準檢驗方法進(jìn)行檢驗，檢驗過(guò)程中要認真、負責、嚴格進(jìn)行無(wú)菌操作，避免環(huán)境中微生物污染。