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    在家庭環(huán)境下進(jìn)行組織培養的探討與建議(上)



    錄入時(shí)間:2011-4-14 13:30:35 來(lái)源:中國組培網(wǎng)

    植物組織培養技術(shù),尤其是快速繁殖,并非只有專(zhuān)業(yè)人員和專(zhuān)業(yè)實(shí)驗室才能夠完成的。作為對多肉植物和組織培養有著(zhù)濃厚興趣的愛(ài)好者,在充分利用家庭條件的基礎上,同樣可以制備出自己的試管苗來(lái)的。在我們進(jìn)行多肉植物的栽培中認識到,一些比較名貴的園藝品種,比如:萬(wàn)象、玉扇、壽、高紋鷹爪等十二卷屬品種,還是繽紛橄欖、何魯牽牛等塊莖類(lèi)植物,甚至于星球屬、巖牡丹屬等等,這些植物的常規繁殖系數很低,他們都可以采用組織培養來(lái)解決其繁殖問(wèn)題,并且可以得到相當數量的幼苗。對于奇想天外等種子萌發(fā)困難的植物,同樣可以借助組織培養來(lái)進(jìn)行無(wú)菌播種。在進(jìn)行組織培養過(guò)程中,不但可以對培養的植物有更深一層的認識,對常規的栽培有著(zhù)相當大的意義。許多搞組織培養的專(zhuān)家,最初都不是專(zhuān)業(yè)學(xué)組培的,就是憑著(zhù)興趣和探索精神取得輝煌成績(jì)的。關(guān)鍵是,愛(ài)好者有著(zhù)濃厚的興趣,非凡的觀(guān)察力和細致入微的操作,這些都可以彌補非專(zhuān)業(yè)的缺陷,并且可以充分利用日常生活中的各種可利用資源,這些就足以讓愛(ài)好者在家庭環(huán)境下完成組織培養了。同時(shí)這也不僅僅滿(mǎn)足了自己的興趣,還可以有一定的經(jīng)濟收益,甚至可以有所創(chuàng )新和發(fā)明。
     
        一、如何解決場(chǎng)地和基本設備:
     
        進(jìn)行組織培養,沒(méi)有一定的設備是無(wú)法開(kāi)展的。正規實(shí)驗室的組織培養設備是昂貴的,不適合家庭消費,但如果能有途徑買(mǎi)到廉價(jià)的實(shí)驗室設備,那就在好不過(guò)了。如果沒(méi)有辦法搞到實(shí)驗室設備,就不妨動(dòng)手自己制作一些簡(jiǎn)單的設備。
     
        1.無(wú)菌操作的主要設備——接種箱和壓力鍋:
     
        接種箱:植物組織培養的主題操作需要在一個(gè)相對密閉的無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。那么說(shuō)我們首先要創(chuàng )造一個(gè)密閉的環(huán)境,可以利用一些木料、塑料板、有機玻璃、鋁合金骨架等等廉價(jià)的材料,動(dòng)手粘合一個(gè)小巧的接種箱。具體的參數可以找一本“食用菌栽培”的書(shū)籍,模仿種蘑菇的接種箱做一個(gè)即可。需要注意的是,組織培養的接種箱的密閉性要求比較高,盡量避免腐朽的木材和易生銹的材料,箱子的頂端按放兩盞燈:20w的紫外線(xiàn)燈和20w的日光燈。箱體的周邊盡量采用玻璃材料,因為這樣便于觀(guān)察,有時(shí)候接種箱還可以借用為培養箱,周邊采用玻璃材料更方便于觀(guān)察和培養。
     
        高壓鍋:主要用來(lái)對培養基和其他材料的滅菌。在實(shí)驗室通常使用醫用高壓滅菌器,然而在家庭要充分利用廚房使用的高壓鍋,高壓鍋的壓力要低于滅菌器,但是適當延長(cháng)滅菌時(shí)間,還是可以取得較好的效果的。比如:對培養基滅菌40分鐘就基本上可以達到滅菌效果(滅菌器是20分鐘);無(wú)菌水采用間歇滅菌法,先用高壓鍋壓40分鐘,放置24小時(shí),再壓20分鐘即可達到效果。
     
        2.場(chǎng)地:
     
        這個(gè)就因人而易了,總體的要求就是進(jìn)行組織培養操作的地方要盡量無(wú)塵,減少空氣流動(dòng),最好有一定的陽(yáng)光。比如書(shū)房、寫(xiě)字間都可以用來(lái)進(jìn)行無(wú)菌操作。
     
        進(jìn)行培養基的配制可以借用一下廚房,但所使用的器具必須和廚具分開(kāi)。一般說(shuō),組織培養中的幾乎全部化學(xué)物質(zhì)對人體是無(wú)害的,除了少數激素類(lèi)物質(zhì)和滅菌劑。對于有毒害的物質(zhì),需要認真保管,以免發(fā)生危險。
     
        3.輔助設備:
     
        主要指冰箱,它是用來(lái)儲存化學(xué)物質(zhì)和培養基的。天平,可以采用感量在100克的托盤(pán)天平,甚至用中藥的藥衡都可以代替。培養架,這個(gè)就更簡(jiǎn)單了,采用鋁合金-玻璃的培養箱既可以滿(mǎn)足要求,如果日光不足,可配合日光燈補光等。
     
        4.化學(xué)試劑:
     
        化學(xué)試劑是不可缺少的,因為組織培養的核心就是培養基的成分,而并不是簡(jiǎn)單的無(wú)菌操作。一些用量較大的化學(xué)物質(zhì)是有必要買(mǎi)的,比如大量元素(硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、高錳酸鉀、甲醛、酒精、白砂糖、瓊脂等等。微量元素和有機復合物不需要購買(mǎi),因為它們的用量很小,我們可以用蔬菜浸汁或者馬鈴薯浸汁來(lái)代替。激素是必不可少的,他們的稱(chēng)量需要借助分析天平,但這是家庭條件所不允許的,如果有條件可以借助關(guān)系單位代替配成母液,每次取一些使用即可。最好的辦法是到農資商店(賣(mài)農藥化肥的地方),它們一般出售農業(yè)用的激素,有的是用安瓿裝的,按照一定的比例加入到培養基當中即可。近幾年來(lái),有些化學(xué)品公司開(kāi)始生產(chǎn)植物組織培養基原粉,只需要稱(chēng)取一定量加水即可,很方便。比如泛生化學(xué)品公司生產(chǎn)的ms原粉,只需要稱(chēng)量
     
        40克,加1升水,用微波爐加熱5分鐘即可分裝,相當簡(jiǎn)便。
     
        消毒劑通常采用氯化汞(劇毒),如果不容易搞到,可以用漂白粉代替。調節酸堿度時(shí),可以采用家庭常用的純堿和白醋。
     
        5.培養容器和玻璃儀器:
     
        組織培養的容器要求并不高,只要玻璃顏色為透明色即可(鈉玻璃不可以)。
     
        我們可以到垃圾站去看看,撿回一些廢舊的果醬瓶就可以了。比較好用的是阿香婆辣醬瓶,我們實(shí)驗室也是采用的這種瓶子。瓶子的封口膜采用聚丙烯塑料即可,如果不好找到,可以采用微波爐專(zhuān)用的錫箔紙甚至方便面的袋子,折疊成雙層,用橡皮圈固定即可。
     
        其它玻璃儀器,比如燒杯、玻璃棒都可以用家庭的杯子和筷子代替;一些度量?jì)x器,如量筒和移液管最好到玻璃儀器商店購買(mǎi),恐怕花不了20元錢(qián)就可以配置一套相當棒的組培玻璃儀器。
     
        6.其它:
     
        還有一些用品是必需的。比如精密ph試紙(5.4~7.0),需要買(mǎi)一本,大約花1.5元即可搞定;酒精燈也不需要買(mǎi),用墨水瓶配上一個(gè)玻璃環(huán),再加上一個(gè)棉花芯,最后用農夫山泉礦泉水的瓶蓋做燈冒,這樣的酒精燈很小巧,適合接種箱使用。刀子剪子鑷子是必需的,到花市的工具攤位上,花10元錢(qián)全部搞定,注意選比較小巧的工具。
     
        關(guān)于用水,按理說(shuō)應該使用蒸餾水,但是我們家庭飲用的純凈水比蒸餾水還要純,那么說(shuō)借用一些飲用水就可以了。我們曾經(jīng)采用康師傅純凈水進(jìn)行動(dòng)物細胞的培養,效果都是很不錯的,更何況于植物細胞培養了。
     

        以上是組織培養的基本設備和試劑,主要突出了他們相關(guān)的替代品,因為作為組織培養中的快速繁殖,它的要求是相當低的。我們的家庭培養和工廠(chǎng)化是不同的,工廠(chǎng)化生產(chǎn)組培苗要追求高增殖率,所以它的要求就比較精細和標準。我們的家庭培養則不需要那么準確,只要達到培養成功的目的即可。當然,如果想提高增殖倍率和試管苗的品質(zhì),必須盡量貼近實(shí)驗室的用具和器材,代用品總是有一定的缺陷的。


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