一、培養基用途：

  用于克羅諾桿菌的選擇性增菌培養。

二、原理：

  胰蛋白胨在培養基為微生物生長(cháng)提供所需的碳源、氮源、維生素、氨基酸及生長(cháng)因子；氯化鈉維持滲透壓；磷酸鹽提供相對穩定的酸堿緩沖體系，月桂基磷酸鈉抑制非大腸菌群類(lèi)細菌的生長(cháng)

  按照GB4789.28-2024《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 培養基和試劑的質(zhì)量要求》中改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬(wàn)古霉素（mLST-vm）質(zhì)量控制方法，與舊版國標GB4789.28-2013相比，存在一點(diǎn)改動(dòng)，新版國標刪除了大腸埃希氏菌ATCC 25922，將舊版國標的附錄D和附錄E合并為新版的附錄F一種質(zhì)量控制方法�，F按照新版國標對其進(jìn)行檢測。

三、培養基成分

四、操作方法

  1、稱(chēng)取本品64.6g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝錐形瓶，每瓶100ml，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至45-50℃時(shí)，每100ml培養基加入過(guò)濾除菌的萬(wàn)古霉素（1mg/ml）1支，混勻分裝無(wú)菌試管，每管10ml備用。

  2、制備工作菌懸液。

  3、接種

  目標菌（阪崎克羅諾桿菌ATCC 29544）：接種10CFU-100CFU/管，接種體積不超過(guò)1mL，接種兩個(gè)平型管。同時(shí)將1mL菌懸液（與試管同一稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL涂布平板）接種兩個(gè)平板，做接種量計數用。

  非目標菌（糞腸球菌ATCC 29212）：接種1000CFU-5000CFU/管，接種體積不超過(guò)1mL，接種兩個(gè)平型管。同時(shí)將1mL菌懸液（比待測培養基試管接種小10-100倍稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL涂布平板）接種兩個(gè)平板，做接種量計數用。

圖一： mLST-vm培養基44±0.5℃培養24±2小時(shí)后

  4、44±0.5℃培養24±2小時(shí)后轉接平板。

  目標菌（阪崎克羅諾桿菌ATCC 29544）：吸取10ul培養液均勻涂布或螺旋涂布到阪崎腸桿菌顯色平板。（注：此處與舊版國標不同，舊版國標為取10ul培養液劃線(xiàn)接種至阪崎腸桿菌顯色培養基）

  非目標菌（糞腸球菌ATCC 29212）：吸取10ul培養液均勻涂布或螺旋涂布到非選擇性平板上（如：TSA）。

  5、將轉接后的平板置于36±1℃培養24±2小時(shí)。

圖二：試管轉接平板后試驗現象

五、實(shí)驗結果

相關(guān)產(chǎn)品：

改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬(wàn)古霉素（mLST-Vm）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

相關(guān)標準：

GB4789.28-2024《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 培養基和試劑的質(zhì)量要求》

注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。

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