GB4789.28-2024培養基與試劑的質(zhì)量要求新版標準更改詳情

  GB4789.28 培養基與試劑的質(zhì)量要求2024版即將施行。相比較與2013版本，改動(dòng)還是比較大的，最主要的還是檢驗方法和測試菌株的改動(dòng)。主要改動(dòng)內容如下：

  （1）商品化即用型培養基條款增加了測試片的質(zhì)控要求；

  （2）水的電導率數值修正，電阻率由≥0.4MΩ/cm更正為≥0.04MΩ/cm。

  （3）培養基的分裝：由原來(lái)的“容器體積至少比培養基體積大20%”改為“培養基體積應不超過(guò)容器容積的2/3”。若培養基裝量過(guò)滿(mǎn)，滅菌降溫過(guò)程以及出鍋搖勻過(guò)程可能由于培養基暴沸溢出，且不利于混合均勻。

  （4）5.1.1培養基和試劑評估具體指標刪除（主要是理化項目），不再需要詳細做每個(gè)項目了，不同實(shí)驗室可以根據需求和自身能力評估對主要的質(zhì)量指標進(jìn)行質(zhì)量控制。

  （5）考慮到許多食品企業(yè)和實(shí)驗室并不具備驗收培養基質(zhì)量的條件和能力，同時(shí)新標準刪除了原本簡(jiǎn)單的驗收方法，使培養基的驗收與出廠(chǎng)檢驗操作相同，因此新版中明確了在生產(chǎn)商提供第三方實(shí)驗室的檢驗報告的情況下，使用者可根據需求選擇是否對培養基進(jìn)行重復測試。

  （6）刪除了即用型培養基微生物污染控制檢驗項目。對于使用者來(lái)說(shuō)，通常購買(mǎi)到即用型產(chǎn)品時(shí)，產(chǎn)品已經(jīng)生產(chǎn)了有一段時(shí)間，從外觀(guān)上大致可以判斷出有無(wú)污染出現，在進(jìn)行檢驗時(shí)通常也會(huì )引入空白對照，在一定程度上也相當于進(jìn)行了微生物污染的控制檢驗。然而對于生產(chǎn)商來(lái)說(shuō)，即使標準刪除了這個(gè)項目，為了確保產(chǎn)品的無(wú)菌性，生產(chǎn)商依然會(huì )對此項目進(jìn)行質(zhì)控。

  （7）刪除了實(shí)驗室驗收商品化培養基的質(zhì)控方法。這個(gè)項目是最大改動(dòng)之一，這是因為原本的驗收方法是比較粗略的，有時(shí)候并不能準確反應培養基的質(zhì)量，因此只保留了檢驗結果更準確的培養基出廠(chǎng)檢驗方法，培養基的出廠(chǎng)檢驗和驗收需使用相同的方法。

  （8）培養基質(zhì)量控制-固體培養基的接種量改動(dòng)：原本接種量為20-200CFU，新標準明確寫(xiě)出每平板細菌和酵母菌的接種量為50-250CFU，每平板霉菌的接種量為30-150CFU。經(jīng)過(guò)驗證，接種量在50-250CFU之間的結果相對穩定，且容易計數，而霉菌由于容易擴散生長(cháng)，因此限定了不同的接種量。

  （9）培養基的質(zhì)量控制-固體培養基的特異性測試接種方式改動(dòng)：由原來(lái)的劃平行直線(xiàn)更改為分區劃線(xiàn)，因為分區劃線(xiàn)更容易得到單菌落，從密集到稀疏可以更準確觀(guān)察菌落的生長(cháng)特征，而平行直線(xiàn)劃法有時(shí)不容易分離到單個(gè)菌落，且不美觀(guān)。

  （10）培養基的質(zhì)量控制-選擇性增菌培養基的目標菌接種改動(dòng)：原標準要求接10-100CFU的目標菌+1000-5000CFU非目標菌的混合菌，培養結束后劃線(xiàn)接種選擇性平板計數，現改為只需接種10-100CFU的目標菌，培養結束后涂布接種選擇性平板計數。

  （11）附錄C中的菌種保存推薦凍存液更改，由原來(lái)的含10-15%甘油的TSB改為含40-60%甘油的BHI做為冷凍保存培養基。

  （12）附錄D中的原料成分說(shuō)明更改，如各種蛋白胨的說(shuō)明、浸粉類(lèi)、膽鹽等成分名稱(chēng)更適合現狀。（如牛肉膏、酵母浸膏等成分，現市場(chǎng)是都廣泛使用牛肉浸粉、酵母浸粉代替，保存期長(cháng)，使用方便）

  （13）新增了參比培養基概念：做為培養基計數的對照培養基，真菌使用SDA做為參比培養基，乳酸菌使用MRS做為參比培養基，常規細菌使用TSA做為參比培養基（一些特殊細菌的參比培養基也是由TSA改進(jìn)的，如弧菌使用TSA+2.5%氯化鈉制成3%TSA做為參比培養基），參比培養基的驗收有著(zhù)嚴格的質(zhì)控菌株要求。

  （14）測試菌株的改動(dòng)。目前隨著(zhù)國家的發(fā)展，國內也已經(jīng)有了較為成熟的菌種保存方法和一些較大的菌種保藏中心，建立了自身較為完善的菌種庫。此次標準修訂主要新增的CMCC菌株和CICC菌株等也是經(jīng)過(guò)驗證，可以等效代替ATCC的菌株進(jìn)行培養基的質(zhì)量控制，以后無(wú)需花費巨額財力購買(mǎi)國外的菌株了，可以在國內多家保藏中心直接購買(mǎi)。

  （15）部分菌株名稱(chēng)更改：如CICC6032由原來(lái)的“德氏乳桿菌保加利亞亞種”更改為“瑞士乳桿菌”，嬰兒雙歧桿菌改為長(cháng)雙歧桿菌嬰兒亞種等，總共有約20個(gè)菌株名稱(chēng)發(fā)生變動(dòng)。

  （16）部分培養基的質(zhì)量要求更改，涉及培養基較多，有些是時(shí)間上的改動(dòng)，如原本培養24h改為18-24h，培養時(shí)間更為靈活。有些是對照培養基改動(dòng)，如空腸彎曲菌的參比計數培養基更改為T(mén)SA+5%裂解血，梭菌的參比計數培養基更改為T(mén)SA+5%脫纖維血。還有像HE瓊脂，改動(dòng)較大，刪除了大腸埃希氏菌質(zhì)控，福氏志賀氏菌改為定性接種。原標準血平皿質(zhì)控菌株蠟樣芽胞桿菌質(zhì)控α溶血已更正，改為用肺炎鏈球菌質(zhì)控α溶血，而新增的TSSB使用蠟樣芽胞桿菌質(zhì)控β溶血。

  （17）新增27個(gè)培養基的質(zhì)量控制和4個(gè)PCR試劑盒的質(zhì)量控制。隨著(zhù)GB4789系列標準的完善，培養基的數量也會(huì )逐漸增加和完善。

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