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一、簡(jiǎn)介
在實(shí)際工作中，經(jīng)常有人將VRBA和VRBGA混淆，甚至有人認為兩者是一種培養基，在購買(mǎi)、使用過(guò)程中造成錯誤。本文主要對這兩種培養基的使用和原理等方面做出詳細說(shuō)明，并對相關(guān)問(wèn)題進(jìn)行探討。
二、比較
兩種培養基的異同情況如表1。
表1 VRBA和VRBGA的比較表
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比較項目 |
VRBA |
VRBGA |
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中文名字 |
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂 |
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂 |
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英文 |
Violet Red Bile Agar |
Violet Red Bile Glucose Agar |
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貨號 |
HB0114 |
HB0176-4 |
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用途 |
用于大腸菌群的固體平板檢測 |
用于腸桿菌科的分離培養 |
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成分 (g/L) |
酵母浸粉 3.0 蛋白胨 7.0 氯化鈉 5.0 乳糖 10.0 3號膽鹽 1.5 結晶紫 0.002 中性紅 0.03 瓊脂 15.0 pH值7.4±0.1 25℃ |
酵母浸粉 3.0 蛋白胨 7.0 氯化鈉 5.0 葡萄糖 10.0 3號膽鹽 1.5 結晶紫 0.002 中性紅 0.03 瓊脂 12.0 pH值7.4±0.2 25℃ |
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成分區別 |
乳糖 |
葡萄糖 |
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原理 |
同 |
蛋白胨提供氮源，碳源，維生素和礦物質(zhì)；酵母浸粉能夠提供微生物生長(cháng)特別需要的B族維生素；氯化鈉可維持均衡的滲透壓；膽鹽和結晶紫能抑制樣品中的革蘭氏陽(yáng)性菌；中性紅為指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。 |
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異 |
乳糖為唯一發(fā)酵底物 |
葡萄糖為唯一發(fā)酵底物 |
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培養條件 |
36℃±1℃培養18h～24h |
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質(zhì) 控 菌 株 特 征 |
大腸 埃希 氏菌 |
紫紅色菌落，可有膽鹽沉淀環(huán) |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
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弗氏 檸檬 酸桿 菌 |
紫紅色菌落，可有膽鹽沉淀環(huán) |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
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陰溝腸桿菌 |
紫紅色菌落，可有膽鹽沉淀環(huán) |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
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鼠傷 寒沙 門(mén)氏 菌 |
紅色菌落，無(wú)膽鹽沉淀環(huán) |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
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福氏 志賀 氏菌 |
紅色菌落，無(wú)膽鹽沉淀環(huán) |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
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通過(guò)比較，我們可以看到兩種培養基的主要成分幾乎一模一樣：蛋白胨提供氮源、碳源、維生素和礦物質(zhì)；酵母浸粉提供微生物生長(cháng)特別需要的B族維生素；膽鹽和結晶紫能抑制樣品中的革蘭氏陽(yáng)性菌；中性紅為指示劑；瓊脂是凝固劑。
兩者的區別在于糖類(lèi)底物的差異：VRBA的底物是乳糖，而VRBGA的底物是葡萄糖。質(zhì)控菌菌落特征有差別：不同的菌用兩種培養基傾注培養，形成的菌落特征會(huì )有差異（如表1、圖1、圖2）。
三、討論
通過(guò)上面的比較，可以看出這是兩款不同用途的培養基，為了更好地理解這兩款培養基，首先要弄清“大腸菌群”和“腸桿菌科”這兩個(gè)概念。
有關(guān)大腸菌群，《GB 4789.3-2016 食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數》中將其定義為“在一定培養條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌”�！按竽c菌群”并不是一個(gè)細菌分類(lèi)學(xué)概念，也就是說(shuō)，在正規分類(lèi)學(xué)譜系中，是找不到“大腸菌群”這個(gè)定義的，普遍定義的大腸菌群通常包括以下幾個(gè)屬：腸桿菌屬（Enterobacter）、檸檬酸菌屬（Citrobacter）、埃希氏菌屬（Escherichia）、克雷伯氏菌數（Klebsiella）、哈夫尼亞菌屬（Hafnia）。
有關(guān)腸桿菌科，《GB 4789.3-2016 食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗腸桿菌科檢驗》中是這樣定義的，“在給定條件下發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、氧化酶陰性的需氧或兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌”。腸肝菌科(Enterobacteriaceae family)是嚴格的細菌分類(lèi)學(xué)定義，包括克羅諾菌屬（Cronobacter）、沙門(mén)氏菌屬（Salmonella）、腸桿菌屬（Enterobacter）、檸檬酸菌屬（Citrobacter）、埃希氏菌屬（Escherichia）、志賀菌屬（Shigella）等等。
腸桿菌科與大腸菌群最大的區別在于，它不能在37°C下發(fā)酵乳糖，進(jìn)而產(chǎn)酸或產(chǎn)氣。因此，像沙門(mén)氏、志賀菌、變形桿菌等這些腸桿菌科中最重要的若干門(mén)類(lèi)都被排除在大腸菌群集群以外。
正是因為上面所述的原因，VRBA（結晶紫中性紅膽鹽瓊脂）內含乳糖作為唯一糖類(lèi)底物，專(zhuān)門(mén)用于檢測大腸菌群。典型大腸菌群細菌在VRBA上呈現紫紅色菌落，有時(shí)帶膽鹽沉淀環(huán)。非大腸菌群如沙門(mén)氏菌屬的菌落呈現紅色，無(wú)膽鹽沉淀環(huán)（如圖1）。當待測產(chǎn)品中本身含有乳糖以外的糖類(lèi)時(shí)，這些糖類(lèi)有可能伴隨進(jìn)入培養酵解過(guò)程，導致非大腸菌群產(chǎn)生假陽(yáng)性結果，這種情況需要對菌落進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。
圖1 不同的菌種在VRBA上的生長(cháng)特征
VRBGA（結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂）培養基的底物是葡萄糖，能支持各種腸桿菌科成員的普遍生長(cháng)，典型腸桿菌科在VRBGA上呈現紅色菌落，帶膽鹽沉淀環(huán)（如圖2），但不能用來(lái)鑒別能酵解乳糖的菌屬和不能酵解乳糖的菌屬（如沙門(mén)氏）。
圖1 不同的菌種在VRBGA上的生長(cháng)特征
基于上面的區別和討論，實(shí)驗人員在使用這兩款培養基時(shí)，要加以區別，避免混淆。另外，大腸埃希氏菌E.coli是大腸菌群的代表菌屬，通常簡(jiǎn)稱(chēng)為大腸桿菌，還有些人對大腸桿菌、大腸菌群和糞大腸菌群這幾個(gè)概念也容易混淆。
相關(guān)知識可參考：大腸桿菌、大腸菌群、糞大腸菌群的定義與區分 點(diǎn)擊查看
相關(guān)產(chǎn)品：
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂（VRBGA）（GB4789.41-2016）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
