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一、標準簡(jiǎn)介
GB 4789.38 《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 大腸埃希氏菌計數》，通過(guò)樣品中大腸桿菌的計數多少，作為糞便污染指標來(lái)評價(jià)食品的衛生狀況，推斷食品中腸道致病菌污染的可能性。
2023年2月10日，食品安全國家標準審評委員會(huì )秘書(shū)處就《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 大腸埃希氏菌計數》等38項食品安全國家標準和修改單（征求意見(jiàn)稿）征集意見(jiàn)，截止日期為2023年3月20日�，F將GB 4789.38（征求意見(jiàn)稿）與GB 4789.38-2012進(jìn)行比對探討。
二、變化要點(diǎn)
《GB4789.38 食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 大腸埃希氏菌計數》中，有關(guān)大腸埃希氏菌的計數共涉及兩種方法：MPN法和平板法，這在兩個(gè)版本中是一致的。但每種方法的檢驗程序和操作步驟都有變化，相應的培養基、設備、相關(guān)試劑和附錄也都有所更改。詳細如下：
1、MPN法檢驗程序
圖1 大腸埃希氏菌MPN計數法檢驗程序（左：2012版 右：征求意見(jiàn)版）
MPN法總共分三個(gè)步驟，初發(fā)酵、復發(fā)酵和分離鑒定。從圖1對比可以看出，有關(guān)分離鑒定這一步，現行標準中是采用先在EMB平板上進(jìn)行劃線(xiàn)培養，根據菌落特征挑取可疑菌落進(jìn)行純化，進(jìn)一步生化試驗進(jìn)行鑒定，判斷結果；在征求意見(jiàn)稿中則直接采用劃線(xiàn)TBX平板進(jìn)行培養的方法。
有關(guān)大腸埃希氏菌在所涉及的兩種培養基（EMB和TBX）上的生長(cháng)狀態(tài)和分離效果如圖2所示：
圖2 EMB和TBX培養基上大腸埃希氏菌的菌落特征和分離效果
2、平板計數法
現行標準中，是“將10 mL～15 mL冷至45℃±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）傾注于每個(gè)平皿中。小心旋轉平皿，將培養基與樣品勻液充分混勻。待瓊脂凝固后，再加3 mL～4 mL VRBA-MUG覆蓋平板表層。凝固后翻轉平板，36℃±1℃培養18 h～24 h。選擇菌落數在10 CFU～100 CFU之間的平板，暗室中360 nm～366 nm 波長(cháng)紫外燈照射下，計數平板上發(fā)淺藍色熒光的菌落�！逼渲兄饕玫搅薞RBA、VRBA-MUG培養基，同時(shí)需要紫外燈照射相配合的形式，進(jìn)行菌落計數。
而在征求意見(jiàn)稿中，則只使用TBX傾注培養的方式即可根據菌落特征進(jìn)行計數（如圖3）。
圖3 大腸埃希氏菌平板計數法檢驗程序（左：2012版 右：征求意見(jiàn)稿）
有關(guān)大腸埃希氏菌及混合菌在所涉及的兩種培養基（VRBA-MUG和TBX）上傾注培養后的生長(cháng)狀態(tài)如圖4所示：
圖4-1 大腸埃希氏菌的生長(cháng)特征和混合菌分離效果
圖4-2 VRBA-MUG上的混合菌在自然光和紫外光下的狀態(tài)
三、討論
兩個(gè)版本相比，修改意見(jiàn)稿中通過(guò)對TBX的引入，使兩種方法的檢驗程序都簡(jiǎn)化了很多。從檢驗效果來(lái)看，也能達到計數的目的，甚至優(yōu)于之前的方法。這種改變是基于目前市場(chǎng)已經(jīng)擁有質(zhì)量過(guò)關(guān)、使用效果較好的TBX培養基為基礎的。實(shí)驗室人員在購買(mǎi)TBX培養基時(shí)，一定要選擇質(zhì)量可靠的廠(chǎng)家，避免對檢驗結果造成影響。
我公司生產(chǎn)的TBX試驗效果如圖5所示：
圖5 TBX培養基上大腸埃希氏菌和其它腸桿菌科細菌的特征
相關(guān)產(chǎn)品：
伊紅美藍瓊脂(EMB)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
結晶紫中性紅膽鹽-4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂(VRBA-MUG)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
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