TBX培養基是青島海博生物公司改良的培養基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。大腸桿菌顯藍綠色,大腸菌群顯無(wú)色,其它菌顯黃色或無(wú)色,革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制。
成分(g/L)
胰蛋白胨
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20.0
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3號膽鹽
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1.5
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5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷(BCIG)環(huán)己胺鹽
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0.075
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瓊脂
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15.0
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pH7.2±0.2 25℃
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此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養成份以獲得最佳的結果。
用法:
稱(chēng)取本品36.6g,加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過(guò)1分鐘。分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘。取1ml制備好的樣品液加入無(wú)菌平皿中心,傾入冷卻至45-50℃培養基約15ml,混勻,凝固后,36±1℃倒置18-24h。
或冷卻至45-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,瓊脂完全凝固后,在超凈工作臺中開(kāi)蓋吹15-30分鐘,去掉培養基表面水汽,加入適當稀釋度的樣品液1ml,涂布于培養基上,36±1℃培養18-24h。
操作步驟:
1. 按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2. 取樣品液1ml加入冷卻至45-50℃顯色培養基中混勻或涂布于平板上;
3. 36±1℃培養18-24h,選用有30-200個(gè)菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍綠色,其它細菌為無(wú)色或黃色菌落?偞竽c桿菌=藍綠色菌落;
4. 對可疑大腸桿菌菌落可劃線(xiàn)接種到營(yíng)養瓊脂平板上, 36+1℃培養12-16小時(shí),挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(本公司有生化鑒定管套裝4種*4套)。
質(zhì)量控制:
1. 外觀(guān)
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈乳白色。制備好的平板呈無(wú)色透明固體。
2. 微生物試驗
在36±1℃培養18-24小時(shí):
質(zhì)控菌株
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ATCC
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生長(cháng)情況
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菌落顏色
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單增李氏菌
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19114
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-/+
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無(wú)色
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金黃色葡萄球菌
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25923
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-/+
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無(wú)色
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大腸桿菌
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25922
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+++
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藍綠色
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沙門(mén)氏菌
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14028
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+++
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無(wú)色
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產(chǎn)氣腸桿菌
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35029
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+++
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無(wú)色
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陰溝腸桿菌
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23355
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+++
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無(wú)色
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方法的局限性:
本培養基鑒定大腸菌群大腸桿菌,少數情況下可能會(huì )出現假陽(yáng)性,但不會(huì )出現假陰性,有時(shí)可能需做其它補充試驗。
典型特征:
大腸桿菌典型菌落為藍綠色,大腸菌群為無(wú)色菌落,其它細菌為無(wú)色或黃色菌落。
貯存:
制備好的平板應立即使用,應避免光線(xiàn)直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8C,注意避光保存。
失效:
干燥培養基超過(guò)保質(zhì)期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意:
此培養基僅供實(shí)驗室使用。
參考文獻:
1. FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of B- glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J.Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2. KILIAN, M. a. BULOW, P:: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidasesActa Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251(1976).
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顯色平板菌落特征
TBX培養基的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時(shí)。
注:回收率計算時(shí),用TSA瓊脂做對照培養基。
相關(guān)資料:
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TBX培養基的試驗原理、試驗方法及結果 點(diǎn)擊查看