標準菌株的接收與管理

一、獲得菌株

  我們在進(jìn)行培養基的驗證時(shí)，需要用到各種陽(yáng)性菌株，可由菌種保藏中心（如ATCC、CMCC、CICC等）購買(mǎi)獲得，也可使用商業(yè)化菌株或樣品分離的特征典型菌株。直接從菌種保藏中心購買(mǎi)菌株通常定義為0代菌株，而商業(yè)化菌株一般僅做為工作菌株使用，商家提供的報告上通常也會(huì )寫(xiě)明代數。接收菌株后，應建立起菌株管理臺賬，記錄菌株的購買(mǎi)日期、來(lái)源、代數等信息。

可參考標準：

《SN/T 2660-2010 食品微生物實(shí)驗室菌種保藏方法》點(diǎn)擊下載

《GB 4789.28-2013 培養基與試劑的質(zhì)量要求》點(diǎn)擊下載

二、菌株的活化、傳代與使用

  初代菌株復活及保存：從菌種保藏中心購買(mǎi)獲得標準菌株后，按照說(shuō)明書(shū)提供的方法進(jìn)行活化培養，每次培養都是一次傳代，活化成功后的菌株為一代，此時(shí)可對菌株進(jìn)行保存，可采用制作凍干粉、瓷珠或甘油管方式在-70℃以下超低溫冷凍保存，同時(shí)須對菌株檢查純度和特性，菌落形態(tài)顏色一致無(wú)污染，并進(jìn)行革蘭氏染色和一些典型生化反應進(jìn)行鑒定，確定菌株無(wú)誤，對菌株的活化過(guò)程、保存代數、保存方式、菌株特性等信息進(jìn)行記錄。

  注：采用超低溫冷凍方式做為標準儲存菌株可長(cháng)期保存，應多保存一些備用，大多數菌株可以保存兩年以上，無(wú)需定期傳代，每年可對菌株進(jìn)行活化確認。

  菌株傳代：將凍存的一代標準儲存菌株接種至非選擇性培養基中活化后，即得到第二代菌株。對菌株的純度和特性檢驗無(wú)誤后，可以做為工作菌株直接使用，也可以制成二代標準儲存菌株進(jìn)行保存，每次的傳代及保存均需填寫(xiě)傳代及保存記錄。

  商業(yè)菌株：商業(yè)菌株一般多數為2-4代工作菌株，按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行保存和使用，不可做為標準儲存菌株，可以傳代使用，但不能超過(guò)五代。

  工作菌株：將儲存菌株或商業(yè)菌株活化后，可直接做為工作菌株使用（有的商業(yè)定量菌株使用生理鹽水溶解后直接做為工作菌株使用），同樣需記錄活化方式、活化時(shí)間、菌落純度及形態(tài)、使用期限、菌株代數、菌株用途、使用人等信息。

  注：除某些標準特殊規定外，工作菌株通常不能超過(guò)五代使用，若已超出五代，除非有完整的驗證資料表明菌株未發(fā)生變異（通常需做多種生化進(jìn)行鑒定），可繼續使用。

三、菌株銷(xiāo)毀

  菌株的活化、傳代及使用過(guò)程中若出現污染、老化、變異等問(wèn)題，不可再繼續使用，以及過(guò)期的工作菌株、儲存菌株等，應進(jìn)行銷(xiāo)毀處理，通�？刹捎酶邏赫羝麥缇�121℃滅菌30min，并填寫(xiě)菌株銷(xiāo)毀記錄。

相關(guān)標準：

《SN/T 2660-2010 食品微生物實(shí)驗室菌種保藏方法》點(diǎn)擊下載

《GB 4789.28-2013 培養基與試劑的質(zhì)量要求》點(diǎn)擊下載

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