酵母菌的糖發(fā)酵試驗-杜氏管發(fā)酵法

一、原理介紹

  酵母菌屬真核生物，與細菌相比，酵母菌具有更完整的呼吸系統，可將糖類(lèi)（包括糖、醇、苷、甙等）徹底氧化分解為二氧化碳和水，而細菌通常只能將糖類(lèi)分解為低分子的有機酸等產(chǎn)物。因此，細菌的糖發(fā)酵試驗常用酸堿指示劑通過(guò)顏色的變化檢測某種糖是否能夠被細菌分解利用，而酵母菌則可以通過(guò)杜氏管觀(guān)察是否產(chǎn)氣，來(lái)判斷酵母菌是否能分解利用某種糖。

二、培養基的配制及接種

  （1）基礎培養基（0.5%酵母液）：稱(chēng)取0.5g酵母浸粉，加熱溶解于100mL純化水中，分裝至含導管的試管中，每支7.2mL（分裝量依試管尺寸而定，120mm試管可分裝3.6mL），115℃滅菌30min或121℃滅菌15min；

  （2）糖溶液：?jiǎn)翁牵ㄈ缙咸烟�、半乳糖等）或雙糖（如蔗糖、乳糖等）用純化水配制成20%溶液，三糖（如棉子糖）用純化水配制成40%溶液，用0.22μm的微孔濾膜過(guò)濾除菌，備用。

  （3）將過(guò)濾除菌的糖溶液0.8mL加入至滅菌后的含7.2mL基礎液的試管中（糖溶液：基礎液=1:9即可），混合均勻，并排掉導管內氣體；

  （4）挑取活化好的待測菌株至生理鹽水中制成約10⁶-10⁸CFU/mL的菌懸液，吸取0.1mL菌懸液加入至糖發(fā)酵試管中，或用接種環(huán)（針）挑取菌苔直接接種至糖發(fā)酵試管中，25℃培養14天，逐日觀(guān)察倒管內是否有氣體產(chǎn)生。

三、試驗現象及解釋

  a、b分別為白色念珠菌和釀酒酵母菌的葡萄糖發(fā)酵試驗，倒管內充滿(mǎn)氣體，即為葡萄糖發(fā)酵陽(yáng)性反應；c、d分別為白色念珠菌和酵母菌的乳糖發(fā)酵試驗，倒管內無(wú)氣體產(chǎn)生，即為乳糖發(fā)酵陰性反應。

  注：強陽(yáng)性反應通常會(huì )在數天內觀(guān)察到氣體迅速充滿(mǎn)倒管；遲緩陽(yáng)性反應通常要培養7-14天可觀(guān)察到氣體充滿(mǎn)倒管；若培養14天后倒管內僅有少量氣體，則為弱陽(yáng)性反應；14天后若導管內無(wú)氣體，則為陰性反應。

相關(guān)產(chǎn)品：

酵母浸粉-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

上一篇：弧菌的培養保存方法和菌懸液制備

下一篇：《中國藥典》對硫乙醇酸鹽流體培養基的相關(guān)規定