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一、實(shí)驗原理
莢膜是細菌細胞壁外的一層粘液性多糖類(lèi)物質(zhì)，其對染料的親和力較弱，因此不容易著(zhù)色，通常采用負染色法染色，讓菌體和背景著(zhù)色而莢膜不著(zhù)色，從而使菌體周?chē)尸F透明圈。由于莢膜本身含水量較多，質(zhì)地疏松且單薄，因此在染色的時(shí)候不能加熱固定，以免莢膜受熱皺縮變形。莢膜染色可用于肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、炭疽芽孢桿菌以及產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定。
二、試驗方法
1、制作適當厚度的細菌涂片，在空氣中自然干燥，不需要加熱固定。
2、滴加適量的A試劑于載玻片上，需將菌體完全覆蓋，染色5-7分鐘。
3、用B試劑沖洗涂片，沖洗要適度，2-3遍即可。
4、用吸水紙吸干，并立刻滴加1-2滴香柏油到涂片上，以防止結晶的形成。
5、由低倍鏡開(kāi)始調節視野，最終在油鏡下觀(guān)察染色結果。
三、實(shí)驗結果
背景為藍紫色，菌體紫色，莢膜為無(wú)色或者淺紫色。如下圖所示：
四、注意事項
1、染色程度可通過(guò)改變染色時(shí)間做適當的調整。
2、脫色時(shí)不可用水沖洗，必須用B液。
3、不能加熱干燥固定涂片，以避免莢膜皺縮。
4、可多挑一些菌苔與水充分混合，并將粘稠的菌液盡量涂布均勻。
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注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
