酒石酸鹽生化管的使用原理及注意事項

一、實(shí)驗原理

 酒石酸鹽試驗是腸桿科菌鑒定常用的生化實(shí)驗，有一些細菌可以產(chǎn)生特定的酶將酒石酸鹽分解為乙酸等比較簡(jiǎn)單的有機酸，使pH值下降，遇到酚紅指示劑后變黃色，而不產(chǎn)該酶的細菌仍為紅色。需要注意的是，該實(shí)驗需在接菌后覆蓋一層無(wú)菌的液體石蠟以隔絕氧氣，避免乙酸等氧化分解，導致pH值重新升高又變?yōu)榧t色，從而造成假陰性。

二、試驗方法

 選取甲型副傷寒沙門(mén)氏菌、乙型副傷寒沙門(mén)氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌，分別穿刺接種至酒石酸鹽生化管中，為了驗證氧氣對該實(shí)驗的影響，每種菌做兩管，其中一管覆蓋無(wú)菌液體石蠟，另一管不覆蓋。37度培養18小時(shí)、24小時(shí)各觀(guān)察一次結果。

三、實(shí)驗結果

 1、不加石蠟生化管，培養18小時(shí)。

 由上圖可發(fā)現，鼠傷寒沙門(mén)氏菌底部有變黃，為陽(yáng)性反應，甲型副傷寒沙門(mén)氏菌、乙型副傷寒沙門(mén)氏菌為紅色，為陰性反應。

 2、不加石蠟生化管，培養24小時(shí)。

 由上圖可發(fā)現，鼠沙由黃色變?yōu)榧t色，說(shuō)明此時(shí)產(chǎn)生的乙酸被氧化分解，導致pH值又重新升高變?yōu)榧t色。

 3、培養24小時(shí)，加石蠟組與不加石蠟組對照。

鼠傷寒沙門(mén)氏菌

甲型副傷寒沙門(mén)氏菌

乙型副傷寒沙門(mén)氏菌

 由上圖可以發(fā)現加石蠟組，黃色會(huì )穩定存在，不會(huì )被氧化為開(kāi)始的紅色，且黃色更為明顯，更有助陽(yáng)性結果的判定。

四、結論

 在做酒石酸鹽生化實(shí)驗時(shí)，接菌后應該覆蓋一層無(wú)菌液體石蠟，防止實(shí)驗結果被氧化，造成假陰性。

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