生物學(xué)特性:
洋蔥伯克霍爾德菌為革蘭陰性桿菌,對營(yíng)養要求不高,一般在普通培養基生長(cháng)良好,最適合生長(cháng)溫度為30℃,在4℃不生長(cháng),42℃生長(cháng)不定。
分布范圍:
洋蔥伯克霍爾德菌存在于土及水中,在醫院環(huán)境中常污染自來(lái)水體溫計噴霧器、血管導管、導尿管、靜脈輸液器等,因而可多種醫院內感染,包括敗血癥、心內膜炎、肺炎、傷口感染、膿腫、眼結膜炎等,是條件致病菌。其細胞膜的不通透性使其對大多數抗生素產(chǎn)生耐藥,在醫院易引起暴發(fā)流行,是醫院感染的重要病原菌之一。
檢驗流程:
根據SN/T4684-2016進(jìn)出口化妝品洋蔥伯克霍爾德菌檢驗方法規定,檢驗流程如下:
典型菌落特征:
含多粘菌素B、慶大霉素的BCSA瓊脂:紅色圓形菌落,表面光滑,周?chē)囵B基變紅
含多粘菌素B、慶大霉素的麥康凱瓊脂:淺黃褐色圓形菌落,表面光滑,周?chē)囵B基不變色
生化鑒定:
葡萄糖氧化實(shí)驗:
挑取可疑菌落,接種于2 支葡萄糖發(fā)酵管,其中一支加滅菌液體石蠟封口,另一支不封口,36℃土1℃,24h。二者均變黃為葡萄糖發(fā)酵型,未加石蠟管變黃而加石蠟管不變色為葡萄糖氧化型。
選擇葡萄糖氧化型,在營(yíng)養瓊脂平板上劃線(xiàn)純化培養,36℃士1℃,24 h。純培養養物繼續進(jìn)行鑒定。
革蘭氏染色:
挑取可疑菌落涂片,進(jìn)行革蘭氏染色。顯微鏡鏡下觀(guān)察,洋蔥伯克霍爾德菌為革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌。
氧化酶試驗:
用玻璃棒或一次性接種針挑取單個(gè)特征性菌落,涂布在氧化酶試劑濕潤的濾紙平板上。洋蔥伯克霍爾德菌為遲緩型氧化酶陽(yáng)性(紫紅色、紫色、或深藍色),反應時(shí)間約為2min - 10min。
注:實(shí)驗中切勿使用鎳/鉻材料
過(guò)氧化氫酶實(shí)驗:
用玻璃棒或一次性接種針挑取單個(gè)特征性菌落,置于潔凈室管內,滴加3%過(guò)氧化氫溶液(臨用時(shí)配置)2ml,觀(guān)察氣泡產(chǎn)生情況。洋蔥伯克霍爾德菌為遲緩產(chǎn)氣,1s后出現氣泡。
蔗糖氧化實(shí)驗:
挑取可疑菌落接種于蔗糖氧化培養基上,36℃±1℃,24h。培養基變黃色為陽(yáng)性,藍色為陰性。洋蔥伯克霍爾德菌為陽(yáng)性反應。
枸櫞酸鹽利用:
挑取可疑菌落接種于西蒙氏枸櫞酸鹽培養基,36℃±1℃培養24h,培養基變藍色為陽(yáng)性,淺綠色為陰性。洋蔥伯克霍爾德菌為陽(yáng)性反應。
七葉苷利用:
挑取可疑菌落接種于七葉苷培養基,30℃士1℃培養 24 h ,培養基變黑色為陽(yáng)性,不變色為陰性。洋蔥伯克霍爾德菌為陽(yáng)性反應。
葡萄糖 |
革蘭氏染色 |
氧化酶 |
過(guò)氧化氫酶 |
蔗糖 |
枸櫞酸鹽 |
七葉苷 |
氧化型 |
陰性 |
遲緩型氧化酶陽(yáng)性 |
陽(yáng)性 |
陽(yáng)性 |
陽(yáng)性 |
陽(yáng)性 |
進(jìn)口化妝品洋蔥伯克霍爾德菌檢驗用培養基(SN/T4684-2016)
用途 | 貨號 | 名稱(chēng) | 規格 |
增菌 | HB5181-4 | 含多粘菌素B的SCDLP液體培養基 | 250g |
添加劑 | HB4131a | 多粘菌素B | 2.5萬(wàn)單位/支*5 |
增菌 | HB9118 | 含慶大霉素的BCSA增菌液 | 250g |
添加劑 | HB9118a | 慶大霉素溶液 | 1mg/支*5 |
分離 | HB9119 | 含多粘菌素B、慶大霉素的BCSA瓊脂 | 250g |
添加劑 | HB4131a | 多粘菌素B | 2.5萬(wàn)單位/支*5 |
添加劑 | 待定 | 慶大霉素溶液 | 1mg/支*5 |
分離 | HB9120 | 含多粘菌素B\慶大霉素的麥康凱瓊脂 | 250g |
添加劑 | HB4131a | 多粘菌素B | 2.5萬(wàn)單位/支*5 |
添加劑 | HB9118a | 慶大霉素溶液 | 1mg/支*5 |
生化 | HB8650 | 3%過(guò)氧化氫酶 | 20支 |
HB2100 | 氧化酶試紙 | 10片 | |
SN094 | 葡萄糖氧化/發(fā)酵管 | 20支 | |
SN093 | 蔗糖氧化生化管 | 20支 | |
GS011 | 西蒙氏枸櫞酸鹽 | 20支 | |
GS021 | 七葉苷 | 20支 |
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