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一、用途：
用于檢驗弧菌的β-半乳糖苷酶的產(chǎn)生能力，亦可用之鑒別遲緩發(fā)酵糖細菌與乳糖陰性細菌。
二、實(shí)驗原理：
細菌分解乳糖依靠?jì)煞N酶的作用，一種是β-半乳糖苷酶滲透酶，它位于細胞膜上，可送乳糖分子滲入細胞，另一種β-半乳糖苷酶，亦稱(chēng)乳糖酶，位于細胞內，能使乳糖水解成半乳糖和葡萄糖。
具有上述兩種酶的細菌，能在24-48h發(fā)酵乳糖，而缺乏此兩種酶的細菌，不能分解乳糖。乳糖遲緩發(fā)酵菌只有β-半乳糖苷酶而缺乏β-半乳糖苷滲透酶，因而乳糖進(jìn)入細胞很慢，需經(jīng)培養基中1%乳糖較長(cháng)時(shí)間的誘導，產(chǎn)生相當數量的滲透酶后，才能較快分解乳糖，故呈遲緩發(fā)酵現象。
ONPG可迅速進(jìn)入細菌細胞，被β-半乳糖苷酶水解，釋放出黃色的臨位硝基苯酚，故由培養液變黃可迅速測知β-半乳糖苷酶的存在，從而確定該菌為乳糖遲緩發(fā)酵菌。
三、試驗方法：
1.用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線(xiàn)一圈，掰開(kāi)待用；
2.將待檢培養物接種3%氯化鈉三糖鐵瓊脂，36±1℃培養18h；
3.挑取1滿(mǎn)環(huán)新鮮培養物接種于生化管中，在通風(fēng)櫥中滴加1滴甲苯，搖勻后置37℃水浴5min后，置于36±1℃培養24h，觀(guān)察實(shí)驗結果。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株，在36±1℃培養18-24小時(shí)：
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
|
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
- |
陰性，顏色不變 |
|
霍亂弧菌 |
/ |
- |
陽(yáng)性，變黃 |
|
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
- |
陰性，顏色不變 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
- |
陽(yáng)性，變黃 |
|
創(chuàng )傷弧菌 |
ATCC27562 |
- |
陽(yáng)性，變黃 |
3%Nacl ONPG生化管質(zhì)控結果
備注：a:副溶血性弧菌，b:霍亂弧菌，c:溶藻弧菌，d:大腸埃希氏菌，e:創(chuàng )傷弧菌，f:空白對照
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品：
3%NaCl ONPG-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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