0.5%堿性復紅使用方法及現象

一、用途及原理

蘇云金芽孢桿菌在形成芽孢的同時(shí)，會(huì )在芽孢旁邊生成一顆菱形、方形或不規則形狀的堿溶性蛋白晶體，稱(chēng)為伴孢晶體。該晶體易被堿性染料著(zhù)色，用堿性復紅染色后，可在顯微鏡下觀(guān)察到深紅色晶體。

此現象為蘇云金芽孢桿菌的特征反應，在《GB4789.14-2014 蠟樣芽胞桿菌檢驗》中，該實(shí)驗為區分蠟樣芽胞桿菌和蘇云金芽孢桿菌的唯一方法。

二、成分

堿性復紅···············0.5g

乙醇·················20mL

蒸餾水················80mL

三、操作方法

1、挑取純培養的單個(gè)可疑菌落接種于硫酸錳營(yíng)養瓊脂平板上，30℃±1℃培養24 h±2 h， 并于室溫放置3 d～4 d；

2.挑取培養物少許于載玻片上，滴加蒸餾水混勻并涂成薄膜。經(jīng)自然干燥，微火固定；

3.加甲醇作用30 s后傾去，再通過(guò)火焰干燥，于載玻片上滴滿(mǎn)0.5%堿性復紅，放火焰上加熱（微見(jiàn)蒸氣，勿使染液沸騰)持續1 min～2 min，移去火焰，再更換染色液再次加溫染色30 s，傾去染液用潔凈自來(lái)水徹底清洗、晾干后鏡檢。

4.油鏡下觀(guān)察有無(wú)游離芽胞（淺紅色）和染成深紅色的菱形蛋白結晶體。

四、試驗結果

①形態(tài)的深紅色菱形或方形晶體為伴孢晶體

②形態(tài)的橢圓形或卵圓形物的為菌體芽孢，一般很難著(zhù)色

③形態(tài)的紅色桿狀物為蘇云金芽孢桿菌菌體

注：如發(fā)現游離芽胞形成的不豐富，應再將培養物置室溫2d～3d后進(jìn)行檢查。 除蘇云金芽胞桿菌外，其他芽胞桿菌不產(chǎn)生蛋白結晶體。

相關(guān)產(chǎn)品：

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