用于大腸菌群的固體平板檢測,其中蛋白胨提供氮源;乳糖提供碳源;去氧膽酸鈉是一種抑菌劑,主要抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng);磷酸氫二鉀是一種緩沖體系;檸檬酸鐵和檸檬酸鈉是一種生長(cháng)促進(jìn)劑;中性紅是一種指示劑,在酸性時(shí)呈紅色,當大腸菌群發(fā)酵乳酸時(shí)產(chǎn)生酸性物質(zhì),所以菌落呈紅色;氯化鈉是維持細菌生長(cháng)時(shí)的滲透壓;瓊脂是一種凝固劑。
二、試驗方法:
稱(chēng)取本品43.0g,加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸1分鐘。冷卻至45-50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿,無(wú)需高壓滅菌。使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。
1、制備質(zhì)控菌液。
2、選擇合適稀釋度的目標菌質(zhì)控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個(gè)平板。
3、用1μL接種環(huán)取非目標菌質(zhì)控菌液1環(huán),將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線(xiàn),同時(shí)接種兩個(gè)平板。
4、35℃倒置培養基培養24小時(shí),記錄實(shí)驗結果。
三、結果判定:
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長(cháng)情況 |
回收率 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
G≤1 |
/ |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紅色菌落 |
傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
無(wú)色透明菌落 |
弗氏檸檬酸鹽桿菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紅色菌落 |
陰溝腸桿菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紅色菌落 |
圖1-2 去氧膽酸鹽瓊脂微生物質(zhì)控結果
備注:a:金黃色葡萄球菌,b:大腸埃希氏菌,c:傷寒沙門(mén)氏菌,d:弗氏檸檬酸鹽桿菌,e:陰溝腸桿菌
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