一、實(shí)驗原理:
用于食品中大腸桿菌的平板計數,其中蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可發(fā)酵的糖類(lèi);氯化鈉可維持均衡的滲透壓;膽鹽和結晶紫抑制革蘭氏陽(yáng)性菌,特別抑制革蘭氏陽(yáng)性桿菌和糞鏈球菌;中性紅為pH指示劑;瓊脂為凝固劑;大腸埃希氏桿菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產(chǎn)生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門(mén)氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
二、試驗方法:
稱(chēng)取本品41.6g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,煮沸2分鐘。冷卻至45-50℃左右時(shí),備用。無(wú)需高壓滅菌。
1、制備質(zhì)控菌液。
2、選擇合適稀釋度的目標菌質(zhì)控菌液1ml,接種到兩個(gè)無(wú)菌平皿中,將10ml-15ml冷至45±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)傾注于每個(gè)平皿中。小心旋轉平皿,將培養基和目標菌質(zhì)控菌液充分混勻。待瓊脂凝固后,再加入3ml-4ml的VRB-MUG瓊脂覆蓋平板表層。
3、用1μL接種環(huán)取非目標菌質(zhì)控菌液1環(huán),將接種環(huán)接觸容器邊緣3次,去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線(xiàn),同時(shí)接種兩個(gè)平板。
4、36±1℃倒置培養基培養18-24小時(shí),記錄實(shí)驗結果。
三、結果判定:接種以下質(zhì)控菌株,36±1℃需氧培養18-24小時(shí):
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長(cháng)情況 |
回收率 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
G≤1 |
/ |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紫紅色菌落,有熒光 |
產(chǎn)氣腸桿菌 |
ATCC13048 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紫紅色菌落,無(wú)熒光 |
弗氏檸檬酸鹽桿菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紫紅色菌落,無(wú)熒光 |
圖1-2 VRB-MUG瓊脂微生物質(zhì)控結果
備注:A:正常情況下拍攝,B:366nm紫外燈下拍攝;
a:金黃色葡萄球菌,b:大腸埃希氏菌,c:產(chǎn)氣腸桿菌,d:弗氏檸檬酸鹽桿菌
相關(guān)產(chǎn)品:
結晶紫中性紅膽鹽-4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂(VRBA-MUG)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
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