海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
一、試驗原理：
用于腸道菌計數和腸桿菌科鑒別。
蛋白胨和酵母粉提供碳氮源和微量元素；葡萄糖是可發(fā)酵的糖類(lèi)；氯化鈉維持均衡的滲透壓；膽鹽和結晶紫抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，特別抑制革蘭氏陽(yáng)性桿菌和糞鏈球菌；中性紅為pH指示劑，瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方（g/L）：
|
酵母粉 |
3.0 |
|
蛋白胨 |
7.0 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
|
葡萄糖 |
10.0 |
|
膽鹽 |
1.5 |
|
結晶紫 |
0.002 |
|
中性紅 |
0.03 |
|
瓊脂 |
13.0 |
|
pH 7.3±0.2 25℃ |
|
三、試驗方法：
粉體裝培養基的使用：
1.稱(chēng)取本品39.5g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，煮沸不要超過(guò)2分鐘，冷卻至50℃左右時(shí)，傾入無(wú)菌平皿。無(wú)需高壓滅菌。
2.使用前，把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。
3.制備質(zhì)控菌液。
4. 選擇合適稀釋度的目標菌質(zhì)控菌液0.1ml，均勻涂布于待測平板以及參比平板上，每一稀釋度接種兩個(gè)平板。
5．用1μL接種環(huán)取非目標菌質(zhì)控菌液1環(huán)，將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體，在平板表面劃六條平行直線(xiàn)，同時(shí)接種兩個(gè)平板。
6. 36±1℃倒置培養基培養18-24小時(shí)，記錄實(shí)驗結果。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養18-24小時(shí)。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質(zhì)控評定標準 |
其他特征 |
|
糞腸球菌 |
ATCC29212 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤5 |
/ |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC8739 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
|
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
PR≥0.7 |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
||
|
福氏志賀氏菌 |
CMCC(B)51572 |
20-200 |
PR≥0.7 |
紅色菌落，有膽鹽沉淀環(huán) |
圖1-2 腸道菌計數瓊脂（VRBDA）微生物質(zhì)控結果
備注：a:糞腸球菌，b:大腸埃希氏菌，c:鼠傷寒沙門(mén)氏菌，d:福氏志賀氏菌
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品：
腸道菌計數瓊脂（VRBDA）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
上一篇：MEE肉湯的使用原理及方法
