一、試驗原理：
胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養基（TSC）用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計數。胰胨、大豆胨和酵母浸粉作為培養基中的基礎營(yíng)養物質(zhì)，提供細菌生長(cháng)所需的碳氮源、維生素和其他的生長(cháng)因子；的產(chǎn)生，產(chǎn)氣莢膜梭菌能利用焦亞硫酸鈉中的S產(chǎn)生硫化氫氣體，與檸檬酸鐵銨中的亞鐵離子反應生成黑色的硫化亞鐵物質(zhì)；D-環(huán)絲氨酸能抑制革蘭氏陰性菌和其他非梭菌細菌的生長(cháng)；瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方（g/L）：
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胰胨 大豆胨 酵母浸粉 檸檬酸鐵銨 焦亞硫酸鈉 瓊脂 pH值7.6±0.2（25℃） |
15.0 5.0 5.0 1.0 1.0 15.0
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三、試驗方法：
1）稱(chēng)取本品47.0g，加熱溶解于1000mL蒸餾水中，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至50℃時(shí)，每250mL培養基加入過(guò)濾除菌的0.5% D-環(huán)絲氨酸溶液20mL，混勻，備用。
2）采用濾膜法，取50mL的水樣用孔徑為0.45μm的濾膜過(guò)濾，然后將濾膜移至TSC瓊脂培養基上，倒置于36℃±1℃厭氧培養24h，計數黑色菌落。
四、試驗結果判斷：
接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養22-24小時(shí)。
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質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
方法 |
質(zhì)控結果 |
其他特征 |
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產(chǎn)氣莢膜梭菌 |
ATCC 13124 |
20-200 |
定量 |
PR≥0.7 |
黑色菌落 |
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艱難梭菌 |
ATCC 43593 |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124
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