實(shí)驗原理:
硝酸鹽培養基中的硝酸鹽可被某些細菌還原為亞硝酸鹽,加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑,可與亞硝酸鹽反應,產(chǎn)生一種紅色重氮化合物而呈陽(yáng)性;硝酸鹽還原的最終產(chǎn)物也因細菌種類(lèi)不同而不同,包括亞硝酸鹽、氨、分子氮和一氧化碳等。若加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑后不變色,再加入少許鋅粉,如果變紅,說(shuō)明培養基中的硝酸鹽未被細菌還原而仍然存在,被鋅粉還原為亞硝酸鹽后與對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑反應顯紅色,則判定為硝酸鹽還原陰性;如果加入鋅粉后仍然不變紅,說(shuō)明培養基中的硝酸鹽已被還原成亞硝酸鹽,進(jìn)而分解成氨、氮等產(chǎn)物,判定為硝酸鹽還原陽(yáng)性。
實(shí)驗方法:
1.用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線(xiàn)一圈,掰開(kāi)待用;
2.將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法,制備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液;
3. 吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中,36±1℃培養24-120h后,觀(guān)察試驗結果。
結果判定:
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
博茲曼軍團菌 |
ATCC33217 |
+++ |
陰性 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
陽(yáng)性 |
圖1-1 硝酸鹽肉湯(還原)質(zhì)控結果
備注:a:博茲曼軍團菌,b:大腸埃希氏菌,c:空白
相關(guān)產(chǎn)品:
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。