一、試驗原理:
本培養基用于食品微生物檢驗中沙門(mén)氏菌的選擇性培養。
蛋白胨、牛肉浸粉在培養基中作為基礎營(yíng)養物質(zhì),為細菌的生長(cháng)提供所需的碳源、氮源、維生素以及一些礦物質(zhì)等元素;氯化鈉維持體系滲透壓平衡;膽鹽主要抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)。培養基中蔗糖、水楊素、乳糖作為鑒別系統,溴麝香草酚藍和酸性復紅作為酸堿指示劑,能把發(fā)酵糖類(lèi)和不發(fā)酵糖類(lèi)的細菌區別開(kāi)來(lái),前者為橘黃色菌落,后者為淡藍色菌落。檸檬酸鐵銨及硫代硫酸鈉分別作為產(chǎn)硫化氫的指示劑和底物,能產(chǎn)硫化氫但不發(fā)酵糖類(lèi)的沙門(mén)氏菌的菌落邊緣呈無(wú)色半透明,中心呈黑色。
二、培養基配方(g/L):
蛋白胨 |
12.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
三號膽鹽 |
9.0 |
乳糖 |
12.0 |
蔗糖 |
12.0 |
水楊苷 |
2.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
溴麝香草酚蘭 |
0.065 |
硫代硫酸鈉 |
5.0 |
檸檬酸鐵銨 |
1.5 |
酸性品紅 |
0.1 |
瓊脂 |
14.0 |
pH 7.5±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
稱(chēng)取本品75.6g,溶解于1000mL蒸餾水中,煮沸不要超過(guò)1分鐘冷至50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,在24小時(shí)內使用。注意保持培養基表面干燥。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時(shí)。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質(zhì)控結果 |
其他特征 |
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC 14028 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
藍綠色菌落,黑色中心 |
福氏志賀氏菌 |
CMCC(B) 51572 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
藍綠色菌落 |
傷寒沙門(mén)氏菌 |
CMCC(B) 50071 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
藍綠色菌落,黑色中心 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G<5 |
橙紅色菌落,有膽酸沉淀 |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
圖A:鼠傷寒沙門(mén)氏菌ATCC 14028 圖B:傷寒沙門(mén)氏菌CMCC(B) 50071
圖C:大腸埃希氏菌ATCC 25922 圖D:糞腸球菌ATCC 29212
五、注意事項
1.培養基不可高壓滅菌,加熱會(huì )導致培養基中的組分遭到破壞。
2.變形桿菌屬細菌在該培養基上生長(cháng)的形態(tài)可能與沙門(mén)氏菌或志賀氏菌相似,因此需要進(jìn)一步試驗后才能判定結果。
3.在該培養基上,大腸菌群菌落周?chē)忻黠@的膽酸鹽沉淀。
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