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一、試驗原理：
胰酪蛋白胨提供氮源、維生素和礦物質(zhì)；葡萄糖提供碳源；氯化鈉維持均衡的滲透壓；溴麝香草酚蘭做指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。本培養基用于鑒別革蘭氏陰性細菌對于葡萄糖的發(fā)酵型和氧化型代謝作用。將同一菌株接種于2支培養基中，其中一支管的培養基上加石蠟等滅菌礦物油脂來(lái)隔離氧氣，另一支管不加。這樣發(fā)酵型細菌在兩管培養基中均產(chǎn)生酸性反應，氧化型細菌則在未加油脂的管中產(chǎn)生酸性反應，而在加油脂的培養管中只有輕度或者沒(méi)有反應變化。
二、培養基配方（g/L）
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胰酪蛋白胨 |
2.0 |
|
磷酸氫二鉀 |
0.3 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
|
葡萄糖 |
10.0 |
|
溴麝香草酚蘭 |
0.08 |
|
瓊脂 |
2.0 |
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pH 7.2±0.1 25℃ |
|
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養成分以獲得最佳的結果
三、 實(shí)驗方法：
取本品19.5g加1L蒸餾水，加熱溶解，分裝試管，每管3ml，116℃高壓滅菌15min。
1．用接種針挑取純培養物，同時(shí)穿刺接種兩管培養基。
2．一管接種后添加滅菌液體石蠟于培養基表面，厚度于5mm，稱(chēng)封閉管，另一管不加，稱(chēng)開(kāi)放管。
3． 36±1℃需氧培養24-48小時(shí)，記錄實(shí)驗結果。
四、試驗結果判斷：
各種菌對O-F培養基呈三種形式：
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質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
代謝類(lèi)型 |
開(kāi)放管 |
封閉管 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
發(fā)酵 |
酸（黃） |
酸（黃） |
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銅綠假單胞菌 |
ATCC27853 |
氧化 |
酸（黃） |
堿（綠） |
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糞產(chǎn)堿桿菌 |
CMCC40001 |
不分解糖 |
堿（綠） |
堿（綠） |
