DNA酶瓊脂的原理及實(shí)驗現象

  用途：用于細菌DNA酶檢測。

  原理：胰蛋白胨和大豆胨提供碳源和氮源；有脫氧核糖核酸酶的細菌分解培養基中的脫氧核糖核酸(DNA)，使DNA長(cháng)鏈水解成數個(gè)單核苷酸的寡核苷酸短鏈；氯化鈣提供陽(yáng)離子作為激活劑；氯化鈉維持均衡的滲透壓；瓊脂是培養基的凝固劑。將鹽酸滴在培養基表面，如DNA酶陽(yáng)性，其菌落周?chē)�可以產(chǎn)生明顯透明環(huán)，如DNA酶陰性，鹽酸與完整的脫氧核糖核酸反應，可形成渾濁的沉淀；如果加入0.1%甲苯胺藍溶液，甲苯胺藍為指示劑，DNA酶陽(yáng)性時(shí)，水解DNA部分為薔薇色；DNA酶陰性時(shí)，甲苯胺藍顯藍色。

  操作步驟：

  使用前，把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。

  1、制備質(zhì)控菌液。

  2、將質(zhì)控菌液劃線(xiàn)于平板上。

  3、36±1℃倒置培養基培養18-24小時(shí)，培養結束后滴加1N鹽酸，記錄實(shí)驗結果。

  微生物試驗：

  接種以下質(zhì)控菌株，36±1℃倒置培養基培養18小時(shí)：

圖1-1  DNA酶瓊脂微生物質(zhì)控結果

備注：a：金黃色葡萄球菌(ATCC25923)；b：金黃色葡萄球菌(ATCC6538)；c：大腸埃希氏菌

  方法的局限性

  本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。

  相關(guān)產(chǎn)品： 

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