GN增菌液的原理及使用注意事項

一、培養基用途及試驗原理：

GN增菌液（簡(jiǎn)稱(chēng)GN肉湯，Gram Negative Bacteria Broth，即革蘭氏陰性菌肉湯）用于革蘭氏陰性菌的選擇性培養，特別是志賀氏菌和沙門(mén)氏菌的增菌培養。

該培養基中胰蛋白胨提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)；葡萄糖和甘露醇提供糖類(lèi)；檸檬酸鈉和去氧膽酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性細菌，特別是糞鏈球菌和各種需氧及厭氧芽孢桿菌，但由于去氧膽酸鈉濃度低，對大腸菌的抑制力較弱，不影響沙門(mén)氏菌和志賀氏菌的生長(cháng)；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是緩沖劑，可緩沖因標本或細菌發(fā)酵糖的酸化作用，可使培養基PH穩定；氯化鈉維持均衡的滲透壓；甘露醇比葡萄糖量多，這對變形桿菌的生長(cháng)有所限制，而對沙門(mén)氏菌和志賀氏菌卻很有利，因為后兩者都能利用甘露醇。所以說(shuō)GN增菌培養基是為從含有超量雜菌的標本中分離沙門(mén)氏菌或志賀氏菌而設計的。

二、培養基的使用方法

1、稱(chēng)取本品39g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，每瓶225mL，115℃高壓滅菌15min；

2、稱(chēng)取檢樣25g，加入裝有225mLGN增菌液的500mL瓶?jì)�，固體食品用均質(zhì)器以8000—10000r/min，或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品用金屬匙或玻璃棒研磨使其乳化；

3、于36±1℃培養6—8h。培養時(shí)間視細菌生長(cháng)情況而定，當培養液出現輕微混濁時(shí)即應中止培養；

4、觀(guān)察結果。

三、試驗結果判斷：

配成的培養基應呈淡黃色透明液體，以下菌株接種此培養基后，經(jīng)36±1℃培養6-8h的生長(cháng)情況如下：

各質(zhì)控菌株在GN增菌液中的培養結果

四、注意事項：

此培養基接種后，培養1-2小時(shí)即有渾濁現象，故經(jīng)6h增菌后應立即轉接至分離平板。因為大腸菌群、綠膿假單胞菌及變形桿菌，在最初的6h生長(cháng)較緩慢，而志賀氏菌和沙門(mén)氏菌可相對大量增殖。

有資料顯示，超過(guò)6h后，隨著(zhù)培養時(shí)間的延長(cháng)，繁殖的菌數目的增加，培養基的抑制作用也會(huì )逐步減弱，從而導致有較強抵抗力的金黃色葡萄球菌生長(cháng)良好。這組資料，再次表明嚴格控制增菌時(shí)間對該培養基使用的重要性，在使用過(guò)程中必須嚴格遵守。

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