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一、用途
用于同時(shí)檢測腸桿菌科細菌的賴(lài)氨酸脫羧酶和產(chǎn)硫化氫試驗,特別用于檢測沙門(mén)氏菌和亞利桑那菌。
二、成分（g/L）及原理
蛋白胨............................5.0
葡萄糖............................1.0
酵母浸粉..........................3.0
L-賴(lài)氨酸鹽酸鹽....................10.0
硫代硫酸鈉........................0.04
檸檬酸鐵銨........................0.5
溴甲酚紫..........................0.02
瓊脂..............................12.5
pH6.7±0.2 at 25℃
培養基中的蛋白胨和酵母浸粉提供基本營(yíng)養物質(zhì)，葡萄糖為唯一可發(fā)酵碳源，硫代硫酸鈉可用于檢測硫化氫的生成，溴甲酚紫為酸堿指示劑。若細菌僅能發(fā)酵葡萄糖，則產(chǎn)酸使培養基變黃，斜面由于產(chǎn)酸較少被氧化生成堿性物質(zhì)，底層不被氧化，因此斜面顯紫色底層顯黃色。有些細菌具有賴(lài)氨酸脫羧酶，使賴(lài)氨酸脫羧產(chǎn)堿，底層又變成紫色。有些細菌可還原硫代硫酸鈉產(chǎn)生硫化氫，并與檸檬酸鐵銨反應生成黑色沉淀。
三、試驗方法
1、稱(chēng)取本品32.0g，加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中，分裝試管，121℃高壓滅菌15min，冷至60℃左右時(shí)，制成斜面。
2、將質(zhì)控菌株劃線(xiàn)后穿刺接種到培養基上。
3、放置于35±1℃恒溫培養箱中需氧培養24±2小時(shí)。
四、結果觀(guān)察
接種以下質(zhì)控菌株，放置于35±1℃恒溫培養箱中需氧培養24±2小時(shí)。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
生長(cháng)情況 |
其它特征 |
|
亞利桑那沙門(mén)氏菌 |
CMCC(B) 47001 |
+++ |
斜面紫色，底層紫色，產(chǎn)硫化氫 |
|
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC 14028 |
+++ |
斜面紫色，底層紫色，產(chǎn)硫化氫 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
+++ |
斜面紫色，底層紫色，不產(chǎn)硫化氫 |
圖1 賴(lài)氨酸鐵瓊脂（LIA）培養基微生物質(zhì)控結果
五、與三糖鐵瓊脂（TSI）對比
三糖鐵瓊脂（TSI）和賴(lài)氨酸鐵瓊脂（LIA）均用于沙門(mén)氏菌的檢測。TSI中除葡萄糖，還含有乳糖和蔗糖，絕大多數沙門(mén)氏菌不發(fā)酵乳糖和蔗糖，產(chǎn)硫化氫，因而在TSI上呈斜面紅色，底層黃色，有黑色沉淀。而亞利桑那沙門(mén)氏菌中部分菌株可以發(fā)酵乳糖，在TSI上呈現出斜面黃色，底層黃色，產(chǎn)硫化氫，這一現象與普通變形桿菌相同（普通變形桿菌發(fā)酵蔗糖不發(fā)酵乳糖，產(chǎn)硫化氫）。奇異變形桿菌（發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵乳糖和蔗糖，產(chǎn)硫化氫）在TSI上呈斜面紅色，底層黃色，并有黑色沉淀，與多數沙門(mén)氏菌現象一致。因此，在TSI上很難將變形桿菌與沙門(mén)氏菌區分開(kāi)。在LIA上，多數沙門(mén)氏菌（包括亞利桑那沙門(mén)氏菌）由于賴(lài)氨酸脫羧酶陽(yáng)性，產(chǎn)硫化氫，因而表現出斜面紫色、底層紫色，底層有黑色沉淀。而變形桿菌不能將賴(lài)氨酸脫羧產(chǎn)堿，因而表現出斜面紫色，底層黃色，底層有黑色沉淀。與TSI相比，LIA能將沙門(mén)氏菌與變形桿菌區分開(kāi)來(lái)，特別是有利于亞利桑那沙門(mén)氏菌的檢測。
圖2 LIA與TSI斜面上沙門(mén)氏菌和變形桿菌的對比
相關(guān)產(chǎn)品：
賴(lài)氨酸鐵瓊脂（LIA）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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